GB 14922 —2022新國(guó)標(biāo)是2023年7月新實(shí)施的該文件主要規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué) 寄生蟲學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)指標(biāo)和項(xiàng)目、規(guī)則、結(jié)果判定和報(bào)告等要求，描述監(jiān)測(cè)方法和程序，適用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等質(zhì)量監(jiān)測(cè)。

SPF級(jí)（無特定病原體級(jí)別）動(dòng)物大鼠和小鼠質(zhì)量要求嚴(yán)格，市場(chǎng)需求旺盛。設(shè)施規(guī)模較大，行業(yè)前景廣闊，需定期開展病原微生物監(jiān)測(cè)，確保維持動(dòng)物的SPF級(jí)別。

目前傳統(tǒng)的病原微生物的監(jiān)測(cè)方法包括：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物抗體制備實(shí)驗(yàn)、雞胚感染實(shí)驗(yàn)、以及細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)等。

這些檢測(cè)方法雖技術(shù)成熟，但操作復(fù)雜且耗時(shí)。此外ELISA檢測(cè)等方法易出現(xiàn)假陰性，因抗體形成存在較長(zhǎng)窗口期，在微生物濃度較低或感染早期難以檢測(cè)到抗體信號(hào)。此時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)則已受感染，導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展PCR檢測(cè)在微生物檢測(cè)中應(yīng)用廣泛，多重PCR已用于支原體檢測(cè)、無菌檢測(cè)及SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物檢測(cè)等領(lǐng)域，尤其適用于陽性率較低的篩查場(chǎng)景。當(dāng)前，多數(shù)大鼠小鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施將樣本送至第三方檢測(cè)公司檢測(cè)并獲取報(bào)告。

若設(shè)施實(shí)驗(yàn)室自檢，病毒檢測(cè)多采用ELISA試劑盒（部分為國(guó)外產(chǎn)品價(jià)格高昂）或單重PCR檢測(cè)試劑盒（相較于多重PCR 更耗時(shí)耗力）。

GB14922-2022規(guī)定大鼠小鼠病原微生物需依據(jù)GB/T 14926（細(xì)菌 真菌 病毒檢測(cè)方法）和GB/T 18448（寄生蟲檢測(cè)方法）逐項(xiàng)檢測(cè)，且每3個(gè)月1次。

上述兩標(biāo)準(zhǔn)多發(fā)布于2001年（2022年實(shí)施），少數(shù)項(xiàng)目發(fā)布于2008年（2009年實(shí)施），而近7年的地方及團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)中核酸檢測(cè)（尤其是PCR）應(yīng)用更為普遍。

綜上所述，傳統(tǒng)檢測(cè)方法（ELISA、細(xì)菌培養(yǎng)）源自20年前的標(biāo)準(zhǔn)，近年標(biāo)準(zhǔn)則更傾向PCR檢測(cè)。

因此，實(shí)驗(yàn)室建立大鼠小鼠核酸分子PCR檢測(cè)方法已刻不容緩，時(shí)不我待?。?！如翼和生物推出的大鼠小鼠病原體多重qPCR檢測(cè)試劑盒，有聯(lián)檢試劑盒，可以完成7-8種病原體的聯(lián)合檢測(cè)，以及病原體的鑒定試劑盒，可直接鎖定具體的病原體，同時(shí)還有常見病毒和細(xì)菌的檢測(cè)試劑盒。特異性高，靈敏度高，低至10 copies/μL可被有效檢測(cè)到。

建議PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室配置

區(qū)域布局：需3個(gè)獨(dú)立區(qū)域——PCR準(zhǔn)備區(qū)（體系配置區(qū)）、核酸提取區(qū) 、PCR擴(kuò)增區(qū)

體系配置區(qū)：需潔凈環(huán)境，配備超凈臺(tái)

核酸提取區(qū)：建議用超凈臺(tái)進(jìn)行取樣操作

PCR擴(kuò)增區(qū)：放置PCR儀器

人員要求：需掌握無菌操作 分子生物學(xué)基礎(chǔ)（提取、PCR）及數(shù)據(jù)分析流程