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科研小鼠骨保護素(OPG)ELISA檢測試劑盒性能:
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于15%。
注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、75、150、300、600、1200 pg/mL
實驗注意事項:
1) 為了避免交叉感染,配置不同濃度標準品,上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。
2) 混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。
3) 每次孵育時,請使用正確的封板膠可保證結果的準確性。
4) 終止液上板書匈奴應同顯色底物上板順序一致;加入終止液后孔內顏色由藍變黃;若孔內有綠色,則表明孔內液體未混勻請充分混合。
科研小鼠骨保護素(OPG)ELISA檢測試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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