prm質(zhì)譜檢測技術服務詳情介紹

平行反應監(jiān)測（Parallel Reaction Monitoring, PRM）是一種基于高分辨率、高精度質(zhì)譜的離子監(jiān)測技術。該技術的原理與SRM/MRM相當，但在蛋白質(zhì)和肽的juéduì定量測定開發(fā)中更方便。它zuì適合通過阿托摩爾水平檢測對復雜樣品中的多種蛋白質(zhì)進行定量。PRM技術是一種新型的無抗體蛋白驗證技術，用于對label free、iTRAQ、TMT、SILAC等相對定量蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)進行驗證，或者對復雜樣品中的目標蛋白進行靶向定量分析。

PRM分析原理

PRM基于Q-Orbitrap作為代表性的四極桿高分辨率質(zhì)譜平臺。與一次執(zhí)行一個躍遷的 SRM 不同，PRM 對前體離子的每個躍遷執(zhí)行全掃描，即并行監(jiān)測前體離子的所有碎片。首先，PRM采用四極桿（Q1）選擇母離子，選擇窗口通常為m/z≤2；然后，前體離子在碰撞室（Q2）中碎裂；zuì后，Orbitrap 取代了 Q3，以高分辨率和高精度掃描所有產(chǎn)物離子。因此，PRM技術不僅具有SRM/MRM目標的定量分析能力，而且還具有定性能力。（1）質(zhì)量精度可達ppm級，比SRM/MRM更能消除背景干擾和假陽性，有效提高復雜背景下的檢出限和靈敏度；(2) 產(chǎn)物離子全掃描，無需選擇離子對和優(yōu)化裂解能，更容易建立分析；(3)更寬的線性范圍：提高到5-6個數(shù)量級。

圖1

基本構成

質(zhì)譜的基本原理是利用質(zhì)譜儀將樣品中的分子離子化，并根據(jù)它們在磁場中的質(zhì)量/電荷比（m/z）分離和檢測。其基本構成包括：

1.離子源（Ionization Source）：

將分析樣品中的分子轉化成離子的裝置。常用的離子化方法包括電離、化學離子化、激光脫附等。

2.質(zhì)量分析器（Mass Analyzer）：

根據(jù)分子的質(zhì)量對其進行分離和篩選。常見的質(zhì)量分析器包括飛行時間質(zhì)量分析器、四極質(zhì)量分析器、離子阱等。

3.檢測器（Detector）：

用于測量離子流的強度和質(zhì)量。檢測器可以是光電倍增管、電子倍增器等。

4.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（Data System）：

用于記錄和處理質(zhì)譜數(shù)據(jù)，通常與計算機系統(tǒng)連接，進行數(shù)據(jù)分析和解釋。

PRM技術亮點

在高通量檢測過程中，保證定量的靈敏度和特異性。

與SRM相比，它不需要母離子/碎片離子對，只需要母離子信息，使得實驗設計更加簡單。

它可以通過二次全掃描進行定性和定量分析，在復雜背景下表現(xiàn)出強大的抗干擾性和高分辨率。

可以根據(jù)需要選擇性地摻入合成的標準肽，從而節(jié)省實驗成本。

PRM技術具有出色的重現(xiàn)性，確保多次重復測試結果的穩(wěn)定性。

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