單克隆抗體糖型分析的常用方法檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

單克隆抗體（mAbs）由單一的B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生，它們與特定的抗原有高度特異性的結(jié)合。除了dànbáizhì結(jié)構(gòu)，單克隆抗體的糖鏈也對其功能、生物分布、免疫原性和穩(wěn)定性有重要影響。因此，對單克隆抗體的糖型進(jìn)行分析是藥物開發(fā)中的一個關(guān)鍵步驟。

以下是常用的單克隆抗體糖型分析方法：

1.毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用（CE-MS）：

這種方法特別適合于分析N-糖型。毛細(xì)管電泳用于分離糖型，而質(zhì)譜用于結(jié)構(gòu)鑒定。

2.液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）：

可以用于分析N-糖和O-糖。首先利用酶解或化學(xué)方法從抗體上釋放糖，然后使用液相色譜進(jìn)行分離和質(zhì)譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。

3.熒光標(biāo)記和HPLC分析：

糖鏈?zhǔn)紫缺会尫挪⑴c熒光標(biāo)簽反應(yīng)，然后使用HPLC進(jìn)行分離和定量。

4.糖凝集素結(jié)合測定（Lectin Blotting）：

使用特定的糖凝集素與特定糖結(jié)構(gòu)結(jié)合，可以用于鑒定特定的糖型結(jié)構(gòu)。

5.NMR（核磁共振）：

可以提供關(guān)于糖結(jié)構(gòu)的詳細(xì)信息，但需要較大的樣品量，并且技術(shù)要求較高。

6.酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)：

使用特定的糖型結(jié)合蛋白或抗體來檢測和定量糖鏈。

每種技術(shù)都有其優(yōu)勢和限制。選擇哪種方法通常取決于分析的目的、樣品的可用量、所需的靈敏度和分辨率以及可用的儀器設(shè)備。在藥物開發(fā)的不同階段，可能需要使用多種技術(shù)來全面評估產(chǎn)品的糖型異質(zhì)性和一致性。

圖1

單克隆抗體糖型分析的常用方法檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹