泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

Ubiquitin (Ub) is among the most phylogenetically conserved proteins known. The primary function of this small, 76 amino acid protein is to clear abnormal, foreign and improperly folded proteins by targeting them for degradation by the 26S proteosome.

1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標記反應中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑

體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性熒光定量檢測試劑盒

免疫印跡AP－BCIP/NBT底物顯色試劑盒

酵母細胞質(zhì)粒提取試劑盒

TRAIL 蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒

通用型幽門螺桿菌Helicobacter pylori基因檢測試劑盒

載玻片細胞蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒-LEPTIN

動物組織鈉/鉀ATP酶（Na＋/K＋ －ATPase）活性比色法

細胞內(nèi)氧化應激活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（單線態(tài)氧氣）

冰凍切片總高氯酸萘醌（PAN）染色試劑盒

植物脯羥化酶（prolil hydroxylase）活性比色法定量檢測試劑盒

石蠟切片組織CDK4蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

麥芽β-葡聚糖酶比色法定量檢測試劑盒

非同位素AP－BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒

細胞肌酸激酶同工酶腦型（CK--BB）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

真菌/酵母細胞線粒體DNA萃取試劑盒

著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體

感光覺蛋白ECPN抗體

染色質(zhì)修飾蛋白2B抗體

KIAA1614蛋白抗體

細胞色素b5還原酶3抗體

β氨基己糖苷酶A抗體

酪蛋白激酶受體B1+B2抗體

泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體A激酶錨定蛋白5抗體