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hESC細(xì)胞培養(yǎng)教程

一.傳代條件

細(xì)胞滿足以下條件之一，即需要進(jìn)行細(xì)胞傳代：

1. 細(xì)胞匯合度達(dá)85%左右，移動(dòng)視野觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，整個(gè)皿密度均勻，沒(méi)有過(guò)大的克隆或者克隆過(guò)于致密的部分，一般皿中心部分比邊緣密度略大;一般情況下每4天傳代一次，即使克隆團(tuán)較小，匯合度不足，也建議不要連續(xù)培養(yǎng)超過(guò)5天；

2. 細(xì)胞匯合度較低，但干細(xì)胞集落過(guò)大，中央細(xì)胞生長(zhǎng)不良；

二.傳代間隔和比例

1. 可根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)需求按1:5~1:20的比列進(jìn)行傳代；

2. 如果細(xì)胞正常，克隆匯合度85%, 大小均勻，建議按照1:10進(jìn)行傳代；

3. 如果密度偏低，則可降低傳代比例，密度偏高，則增加傳代比例。