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上海徠同生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年
Seahorse XF 細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試技術(shù)服務(wù)2021/11/24
SeahorseXF細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試SeahorseXF細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試全面了解線粒體功能1、實(shí)驗(yàn)背景安捷倫SeahorseXF細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試通過(guò)在SeahorseXFe和XF細(xì)胞外流量分析儀上直接測(cè)量細(xì)胞的氧消耗速率（OCR）來(lái)表征線粒體功能的關(guān)鍵參數(shù)。它是基于培養(yǎng)板的活細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)OCR。實(shí)驗(yàn)使用XF傳感器探針板內(nèi)置的加藥孔在實(shí)驗(yàn)過(guò)中將呼吸作用的調(diào)節(jié)劑加入細(xì)胞孔中，從而得到反映線粒體功能的關(guān)鍵參數(shù)。實(shí)驗(yàn)試劑盒里的調(diào)節(jié)劑為寡霉素（Oligomycin），羰基氰-4（三氟甲氧基
細(xì)胞血管生成實(shí)驗(yàn)原理2021/11/23
細(xì)胞血管生成實(shí)驗(yàn)細(xì)胞血管生成技術(shù)服務(wù)介紹血管生成是腫瘤發(fā)生過(guò)程中新血管的形成。它是指源于已存在的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后微靜脈的新的毛細(xì)血管性血管的生長(zhǎng)。腫瘤血管生成是一個(gè)極其復(fù)雜的過(guò)程，一般包括包括血管內(nèi)皮基質(zhì)降解、內(nèi)皮細(xì)胞移行、內(nèi)皮細(xì)胞增殖、內(nèi)皮細(xì)胞管道化分支形成血管環(huán)和形成新的基底膜等步驟。細(xì)胞血管生成客戶(hù)需知1）、客戶(hù)需提供生長(zhǎng)狀態(tài)良好的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)條件；2）、客戶(hù)需準(zhǔn)確告知實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)內(nèi)容，如樣本濃度等。
Transwell測(cè)細(xì)胞遷移原理2021/11/23
Transwell測(cè)細(xì)胞遷移Transwell測(cè)細(xì)胞遷移技術(shù)服務(wù)介紹將培養(yǎng)細(xì)胞上層小室放入培養(yǎng)板中，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔，將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi)，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過(guò)不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。該實(shí)驗(yàn)細(xì)分為如下4類(lèi)：細(xì)胞共培養(yǎng)：兩種細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)，研究其中一種細(xì)胞分泌的因子對(duì)另一細(xì)胞性能的影響，此時(shí)選擇小于3.0um孔徑，細(xì)胞不會(huì)遷移通過(guò)，將細(xì)胞A種于上室，細(xì)胞B種于下室，可以研究細(xì)胞B分泌或
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)原理介紹2021/11/23
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹細(xì)胞劃痕(修復(fù))法是一種簡(jiǎn)捷的測(cè)定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法，類(lèi)似體外傷口愈合模型。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其他硬物在細(xì)胞生長(zhǎng)的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至設(shè)定時(shí)間(采用無(wú)血清或低血清(排除細(xì)胞增殖的影響)，取出培養(yǎng)板，觀察周邊細(xì)胞是否生長(zhǎng)(修復(fù))至中央劃痕區(qū)，以此判斷細(xì)胞的生長(zhǎng)遷移能力。通常設(shè)定正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組中添加某些處理因素或藥物、外源性基因等，通過(guò)不同分組之間的細(xì)胞對(duì)于劃痕區(qū)的修復(fù)能力，判斷比
MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖檢測(cè)2021/11/23
MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖檢測(cè)技術(shù)服務(wù)介紹MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在特定波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。CCK-8檢測(cè)試劑盒是應(yīng)用WST-8取代MTT被還原，WST-8是一種類(lèi)似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的甲瓚。WST-8產(chǎn)生的甲瓚比XTT和MTS
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)2021/11/23
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)服務(wù)介紹TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)(TUNELApoptosisAssay)是一種高靈敏度又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。對(duì)于待檢測(cè)的細(xì)胞或組織樣品，經(jīng)過(guò)生物素標(biāo)記和后續(xù)的DAB顯色等步驟，即可在普通光學(xué)顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞。TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)內(nèi)容結(jié)果內(nèi)容石蠟切片檢測(cè)報(bào)告，照片冰凍切片細(xì)胞爬片實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)客戶(hù)須知樣本要求：取材保持組織新鮮（組織塊以小于2cm×1.5cm×0.3cm為宜），立即放入固定液中（固定
同位素標(biāo)記定量實(shí)驗(yàn)2021/11/22
同位素標(biāo)記定量iTRAQ（isobaricTagsforRelativeａndAbsoluteQuantitation）&TMT（TandemMassTags）分別由ABSciex公司和Thermo公司研發(fā)的多肽體外標(biāo)記定量技術(shù)，利用多種同位素試劑標(biāo)記蛋白多肽N末端或者賴(lài)氨酸側(cè)鏈基團(tuán)，不同分子量的試劑對(duì)不同來(lái)源的樣品進(jìn)行標(biāo)記從而實(shí)現(xiàn)不同樣品間蛋白質(zhì)組的比較。iTRAQ/TMT試劑由三部分組成：報(bào)告基團(tuán)、平衡基團(tuán)和反應(yīng)基團(tuán)。反應(yīng)基團(tuán)形成2-10種等質(zhì)量同位素標(biāo)簽。iTRAQ/TMT試劑標(biāo)記酶解后的
瓊脂糖凝膠電泳原理2021/11/22
瓊脂糖凝膠電泳脂糖凝膠電泳原理脂糖凝膠電泳的分析原理與其他支持物電泳最主要區(qū)別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過(guò)時(shí)會(huì)受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動(dòng)時(shí)受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力?，F(xiàn)廣泛應(yīng)用于核酸的研究中。核酸會(huì)根據(jù)pH不同帶有不同電荷，在電場(chǎng)中受力大小不同，因此跑的速度不同，根據(jù)這個(gè)原理可將其分開(kāi)。實(shí)驗(yàn)步驟1.制膠：使用電泳緩沖液在制膠器上配制1.0%的瓊脂糖凝膠2
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）2021/11/22
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)
免疫印跡（WB）2021/11/22
免疫印跡（WB）免疫印跡是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。實(shí)驗(yàn)意義WB用于鑒定能夠被特異性抗體識(shí)別的大分子抗原（通常是蛋白質(zhì)），并測(cè)定抗原的分子量。實(shí)驗(yàn)步驟1.蛋白樣品制備2.電泳分離3.電轉(zhuǎn)移4.免疫印跡顯色：ECL顯色系統(tǒng)結(jié)果展示實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)1.實(shí)驗(yàn)周期：2-3周2.交付標(biāo)準(zhǔn)：黑白顯色圖、內(nèi)參、灰度值分析、柱狀圖、實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等）需確認(rèn)的信息1.樣本種屬及類(lèi)型，是組織還是細(xì)胞。2.需要檢測(cè)目標(biāo)蛋白。3.檢測(cè)分樣本數(shù)及分組，每張膜的上樣順序。
COIP免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)原理2021/11/18
COIP免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)原理COIP免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專(zhuān)一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。這是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其原理是：當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí)，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用就被保留了下來(lái)。假如用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來(lái)。目前多用精制的proreinA預(yù)先結(jié)合固化在argarose的beads上，使之與含有
CHIP免疫沉淀2021/11/18
CHIP免疫沉淀染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)是一種用于表觀遺傳學(xué)研究的技術(shù)，可以快速反映蛋白質(zhì)-DNA相互作用。想要獲得理想的結(jié)果，選擇適合的抗體固然很關(guān)鍵，ChIP流程中所有步驟也很重要。該技術(shù)利用了多種分子生物學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)方法。CHIP免疫沉淀實(shí)驗(yàn)原理：染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)的原理是：在生理狀態(tài)下把細(xì)胞內(nèi)的DNA與蛋白質(zhì)交聯(lián)在一起，通過(guò)超聲或酶處理將染色質(zhì)切為小片段后，利用抗原抗體的特異性識(shí)別反應(yīng)，將與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段沉淀下來(lái)。染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)一般包括細(xì)胞固定，染色質(zhì)斷裂，染色質(zhì)免疫
裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)2021/11/17
實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介從體外細(xì)胞試驗(yàn)到動(dòng)物水平體內(nèi)試驗(yàn)，是基因功能研究的重要飛躍。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，由于其更能模擬人類(lèi)的生理和病理?xiàng)l件，在腫瘤研究中，最常規(guī)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)就是裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)。由于大部分腫瘤研究使用的是人類(lèi)細(xì)胞，所以由于異種排斥的存在，我們需要免疫缺陷型小鼠來(lái)作為移植瘤模型的載體，通過(guò)對(duì)該小鼠的注射腫瘤細(xì)胞，使其成瘤，觀察流體的生長(zhǎng)來(lái)判斷其生物學(xué)變化。藥物對(duì)人癌細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制實(shí)驗(yàn)，裸鼠是先天性胸腺缺陷的突變小鼠，主要表現(xiàn)為無(wú)毛以及缺乏正常胸腺。由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情況下，不排斥來(lái)自異種動(dòng)物的組織移
IP-MS：蛋白質(zhì)互作/后修飾原理2021/11/17
免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析（IP-MS）原理介紹：蛋白質(zhì)相互作用（Protein-ProteinInteractions,PPIs）和翻譯后修飾（Post-TranslationalModifications,PTMs）的數(shù)據(jù)是能顯著提高基礎(chǔ)類(lèi)研究文章檔次的內(nèi)容。篩選和發(fā)現(xiàn)目的蛋白（target）在細(xì)胞中新的互作蛋白或者新的后修飾，免疫沉淀（IP，Immunoprecipitation）結(jié)合LC-MS（液相色譜-質(zhì)譜連用，蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心工具）是目前的主流技術(shù)方案（IP-MS）。通過(guò)一次IP-MS
CCK-8法檢測(cè)不同濃度化合物對(duì)細(xì)胞增殖活性影響2021/11/16
CCK-8法檢測(cè)不同濃度化合物對(duì)細(xì)胞增殖活性影響實(shí)驗(yàn)儀器與試劑表格一：實(shí)驗(yàn)儀器儀器細(xì)胞培養(yǎng)箱酶標(biāo)儀表格二：試劑試劑廠家MEM培養(yǎng)液(MCF-7細(xì)胞)HycloneRPMI1640培養(yǎng)液(GES-1細(xì)胞)Hyclone胎牛血清GibcoCCK-8試劑Biosharp一、實(shí)驗(yàn)步驟1、細(xì)胞消化、計(jì)數(shù)、配制成濃度為5×104個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔加入100μL細(xì)胞懸液（每孔5×103個(gè)細(xì)胞）；2、將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜；3、使用*培養(yǎng)液（90%培養(yǎng)液+10
掃描電鏡的原理及特點(diǎn)2021/11/16
掃描電鏡在觀察生物樣品時(shí)，而能否獲得真實(shí)、清晰、理想的掃描電鏡觀察結(jié)果，樣品的制備過(guò)程是關(guān)鍵。下面介紹一下掃描電鏡的原理和掃描電鏡的特點(diǎn)。掃描電鏡的原理掃描電鏡從原理上講就是利用聚焦得非常細(xì)的高能電子束在試樣上掃描，激發(fā)出各種物理信息。通過(guò)對(duì)這些信息的接受、放大和顯示成像，獲得測(cè)試試樣表面形貌的觀察。當(dāng)一束極細(xì)的高能入射電子轟擊掃描樣品表面時(shí)，被激發(fā)的區(qū)域?qū)a(chǎn)生二次電子、俄歇電子、特征x射線和連續(xù)譜X射線、背散射電子、透射電子，以及在可見(jiàn)、紫外、紅外光區(qū)域產(chǎn)生的電磁輻射。同時(shí)可產(chǎn)生電子-空穴對(duì)、
U937細(xì)胞效率轉(zhuǎn)染條件分享2021/09/08
U937細(xì)胞效率轉(zhuǎn)染條件分享轉(zhuǎn)染材料準(zhǔn)備1、轉(zhuǎn)染試劑用量：10ul2、DNA/siRNA濃度：電訊3、細(xì)胞密度：1*106-1*1054、轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板：6孔板5、轉(zhuǎn)染試劑：AD600025AdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑6、轉(zhuǎn)染時(shí)間：15小時(shí)7、細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清：Z7181FBS-500胎牛血清8、細(xì)胞凍存液：L0100無(wú)血清細(xì)胞凍存液操作過(guò)程：1.提前1天接種細(xì)胞：細(xì)胞匯合度在60-80%左右，再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。2.核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照比例關(guān)系直接混合，用移液器吹打、混勻，室溫靜
Thp-1細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)染條件分享2021/09/08
轉(zhuǎn)染材料準(zhǔn)備：1、轉(zhuǎn)染試劑用量：10ul2、siRNA濃度：20um/L3、細(xì)胞密度：1*106-1*1054、轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板：6孔板5、轉(zhuǎn)染試劑：AdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑；貨號(hào)：AD6000256、轉(zhuǎn)染時(shí)間：48小時(shí)7、細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清：Z7180FBS-500超低內(nèi)毒素胎牛血清8、細(xì)胞凍存液：L0100無(wú)血清細(xì)胞凍存液注意：本細(xì)胞轉(zhuǎn)染用量條件不適合lipo使用。操作過(guò)程：1.提前1天接種細(xì)胞：細(xì)胞匯合度在60-80%左右，再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。2.核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照比例關(guān)系
2.5L微需氧產(chǎn)氣袋AnaeroPack C-2安寧包2021/08/13
產(chǎn)品名稱(chēng)：2.5L微需氧產(chǎn)氣袋產(chǎn)品貨號(hào)：C-2包裝規(guī)格：10只/包產(chǎn)品用途：配合密封罐使用，用于微需氧微生物的培養(yǎng)。本品可吸收容器中的O2，使其濃度變?yōu)?-9%，CO2濃度變?yōu)?-8%。每一個(gè)鋁塑包裝中含有一片紙袋（微需氧產(chǎn)氣袋）。產(chǎn)品特點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便——不用加水、不用催化劑，只需把藥劑(產(chǎn)氣袋)外袋剪開(kāi)放入容器內(nèi),密封后即可形成適宜的厭氧、微需氧、二氧化碳培養(yǎng)環(huán)境。適用廣泛——培養(yǎng)容器內(nèi)不會(huì)產(chǎn)生壓差，不會(huì)產(chǎn)生高溫。同型號(hào)的培養(yǎng)容器可通用，廢棄物處理方便，不污染環(huán)境。高效經(jīng)濟(jì)——無(wú)須使用昂貴且占空
日本三菱MGC厭氧產(chǎn)氣袋工作原理2021/07/28
日本三菱MGC厭氧產(chǎn)氣袋工作原理厭氧產(chǎn)氣袋AnaeroPack——是由日本三菱瓦斯化學(xué)株式會(huì)社發(fā)明的系列一類(lèi)產(chǎn)品，其基本原理是將密閉空間中的氧氣*或者部分吸收掉，然后產(chǎn)生二氧化碳?xì)怏w。產(chǎn)品名稱(chēng)：2.5L厭氧產(chǎn)氣袋國(guó)內(nèi)貨號(hào)：C-1包裝規(guī)格：10只/包產(chǎn)品用途：配合密封罐使用，用于厭氧微生物的培養(yǎng)。本品可吸收容器中的全部O2，同時(shí)產(chǎn)生約21%的CO2。每一個(gè)鋁塑包裝中含有一片紙袋（厭氧產(chǎn)氣袋）。產(chǎn)品特點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便——不用加水、不用催化劑，只需把藥劑(產(chǎn)氣袋)外袋剪開(kāi)放入容器內(nèi),密封后即可形成適宜的厭
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