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胎牛血清給細(xì)胞提供的益處,有哪六個(gè)方面?2023/02/14
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的添加培養(yǎng)基。它營(yíng)養(yǎng)豐富,大約含有三四百種不同成分,具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營(yíng)養(yǎng)因子。它給細(xì)胞提供的益處主要有六個(gè)方面:1.提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然激素或天然生長(zhǎng)因子,如胰島素、IGFII等。2.提供天然的結(jié)合蛋白如胎球蛋白、白蛋白等,能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。胎球蛋白(Fetuin),具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn),能調(diào)節(jié)血清中的鈣離子濃度。3.提供細(xì)胞外基質(zhì)成分,便于細(xì)胞粘附、貼壁、鋪展。當(dāng)然,有些細(xì)胞也能分泌部分外基質(zhì)成分,但血清中的更不可
細(xì)胞培養(yǎng)的方法2023/02/06
1.玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;2.無(wú)菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上;3.培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無(wú)菌試驗(yàn):將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi),用無(wú)菌的玻璃離心管或玻璃瓶取培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天,肉眼見(jiàn)無(wú)渾濁或沉淀等異物.分裝后置-20度保存;4.消化液(pH7.8)或其它加入液,應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無(wú)菌濾器過(guò)濾除菌,分裝成支置-20度保存;5.培養(yǎng)箱應(yīng)先
瓊脂糖凝膠是什么?作用有哪些?2023/02/02
瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學(xué)修飾后熔點(diǎn)降低的低熔點(diǎn)瓊脂糖,瓊脂糖的熔點(diǎn)在62?65°C之間,融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時(shí),30°C時(shí)凝固成膠。多用于對(duì)染色體DNA在凝膠內(nèi)進(jìn)行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離?;窘Y(jié)構(gòu):瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級(jí)鏈如氫鍵來(lái)維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40
RIPA裂解液的使用方法及注意事項(xiàng)2023/02/01
RIPA主要是從動(dòng)物組織和動(dòng)物細(xì)胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA的本意是RadioImmunoprecipitationAssay。RIPA裂解液的配方有很多種,根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類(lèi)。使用方法:對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:1.融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM。2.對(duì)于
你所不了解的過(guò)氧化氫酶(CAT)2023/01/31
過(guò)氧化氫酶是一種普遍存在于幾乎所有生物體內(nèi)的一種抗氧化酶,主要分布于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、動(dòng)物的肝和紅細(xì)胞中。它是過(guò)氧化物酶體的標(biāo)志酶,約占過(guò)氧化物酶體酶總量的40%。過(guò)氧化氫酶是由四個(gè)多肽鏈組成的同源四聚體,每一個(gè)亞基含有超過(guò)500個(gè)氨基酸殘基,且每個(gè)亞基的活性位點(diǎn)都含有一個(gè)卟啉血紅素基團(tuán),用于催化過(guò)氧化氫的反應(yīng)。過(guò)氧化氫酶的最適pH接近7,最適溫度則因物種而異。過(guò)氧化氫酶的主要作用是催化過(guò)氧化氫分解為水和氧氣,清除體內(nèi)的過(guò)氧化氫,從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害,是生物防御體系的關(guān)鍵
蛋白酶K的原理和應(yīng)用2023/01/30
新型蛋白酶K(ProteinaseK)的基因序列來(lái)源于林伯氏白色念球菌(Tritirachiumalbumlimber)的蛋白酶K基因,經(jīng)過(guò)了基因定點(diǎn)突變和酵母細(xì)胞分泌表達(dá)、色譜純化。經(jīng)過(guò)蛋白質(zhì)工程化的新型蛋白酶K提高了比活性和純度,不含有細(xì)菌內(nèi)毒素,應(yīng)用范圍比天然蛋白酶K更廣泛。新型蛋白酶K是現(xiàn)有蛋白酶中活性最高的品種,在pH4到pH12的條件下均有活性,反應(yīng)溫度介于0~75oC之間。在常用濃度的SDS、尿素或EDTA存在時(shí)亦很穩(wěn)定。酶切割位點(diǎn)在脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,可以用于
甲苯和二甲苯的區(qū)別2023/01/29
物理性質(zhì)不同、化學(xué)性質(zhì)不同。物理性質(zhì)不同:氣味方面,苯常溫下是甜味,有芳香氣味,甲苯有苯樣氣味,二甲苯有強(qiáng)烈刺激性。溶解度方面,苯難溶于水,甲苯極微溶于水;二甲苯易流動(dòng),能與無(wú)水乙醇、C?H?OC?H?和其他許多有機(jī)溶劑混溶?;瘜W(xué)性質(zhì)不同:苯參加的化學(xué)反應(yīng)大致有3種:取代反應(yīng);發(fā)生在苯環(huán)上的加成反應(yīng);一種是普遍的燃燒。而甲苯的化學(xué)性質(zhì)較為活潑,可進(jìn)行氧化、磺化、硝化和歧化反應(yīng),以及側(cè)鏈氯化反應(yīng),甲苯能被氧化成苯甲酸。二甲苯可發(fā)生氧化、硫化、磺化反應(yīng)。甲苯,無(wú)色澄清液體,有苯樣氣味,有強(qiáng)折光性,能
萘乙酸鈉的發(fā)展歷史2023/01/28
在世界農(nóng)業(yè)發(fā)展近代歷shishang,人們很早就開(kāi)始了萘乙酸的合成方法的研究,并取得了一定的研究成果。上世紀(jì)60年代始,國(guó)外就開(kāi)始了它的應(yīng)用研究和機(jī)理作用分析。并對(duì)其在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)上的作用,有了進(jìn)一步的了解和認(rèn)識(shí)。由于工業(yè)體系滯后,加之外國(guó)對(duì)我們的技術(shù)fengsuo,在我國(guó),對(duì)萘乙酸的研究起步較晚。直到上世紀(jì)70年代中期,萘乙酸才在河南安陽(yáng)開(kāi)始生產(chǎn)。我國(guó)對(duì)萘乙酸及其衍生物的認(rèn)識(shí)、了解,和生產(chǎn)、應(yīng)用,都落后于世界一大步。隨著改革開(kāi)放,我們的工業(yè)體系逐步完善,科研力量逐漸增強(qiáng),對(duì)農(nóng)業(yè)科技的投入逐年加
離心管的分類(lèi)2023/01/13
按照大小大量離心管(500mL、250mL)普通離心管(50mL、15mL)微量離心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL)按照底部形狀錐形離心管,底部為錐形,是使用最多的離心管類(lèi)型平底離心管圓底離心管按照蓋子閉合方式壓蓋離心管,以按壓方式密封的離心管,常見(jiàn)于微型離心管螺旋蓋離心管,又可分為平蓋(蓋子頂部是平的)和塞蓋(蓋子頂部有塞子形狀)按照材料塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管1、塑料離心管塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出樣本。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶
抗壞血酸對(duì)環(huán)境的危害2023/01/12
除非特別排除,否則在農(nóng)藥化學(xué)制劑(包括抗微生物農(nóng)藥化學(xué)制劑)中使用VitaminC作為惰性或活性成分所產(chǎn)生的殘留物,如果其使用符合良好的農(nóng)業(yè)或制造慣例,則可免于遵守《FFDCA》第408節(jié)中的耐受性要求。VitaminC可燃,但無(wú)明火。粉塵在空氣中形成易爆混合物,爆炸嚴(yán)重程度適中。健康危害過(guò)量使用VitaminC,有以下健康危害:生長(zhǎng)期兒童大于3g/日,數(shù)月后會(huì)影響骨質(zhì)對(duì)鈣磷吸收,成年后易患骨病。成人大于3g/日,則尿中排出量增加,因VitaminC與葡萄糖在還原方面反應(yīng)是相同的,故因其還原性可
谷胱甘肽的檢測(cè)手段2023/01/11
谷胱甘肽檢測(cè)方法較多,比較常用的有碘量法、DTNB(Ellman試劑)法、亞硝基鐵氰化鈉法、熒光法、四氧嘧啶法和高效液相色譜法(HPLC)。上述方法各有優(yōu)點(diǎn),在檢測(cè)GSH含量時(shí)可根據(jù)實(shí)際情況,選擇適合、靈敏、精確的檢測(cè)方法。DTNB比色法原理:DTNB與谷胱甘肽的巰基反應(yīng)生成黃色的5-硫代-2-硝基苯甲酸,在412nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰,而DTNB在400nm以上幾乎沒(méi)有吸收峰。向含有谷胱甘肽的試樣中加入少量的DTNB,將反應(yīng)液在412nm處測(cè)定吸收值,根據(jù)吸收值的大小即可求得谷胱甘肽含量。方法
復(fù)合氨基酸粉的用途2023/01/09
1、可為植物提供更全面的營(yíng)養(yǎng),可做葉面肥、濃縮肥、液態(tài)肥原料;2、能補(bǔ)充魚(yú)粉加工過(guò)程中流失的zuiyouxiao的20%營(yíng)養(yǎng)成份,或補(bǔ)充非全魚(yú)加工的魚(yú)粉營(yíng)養(yǎng)不全面的氨基酸,含有動(dòng)物所必需的多種營(yíng)養(yǎng)全面的氨基酸有效成份,能補(bǔ)充各種必需氨基酸,特別是彌補(bǔ)常規(guī)飼料原料及植物飼料中容易缺乏的必需氨基酸,利用平衡的“木桶效應(yīng)”原理,對(duì)其它營(yíng)養(yǎng)成份起增效作用;3、含有的多種營(yíng)養(yǎng)成份經(jīng)微生物發(fā)酵后呈離子狀態(tài)wanquan溶于水,利于水產(chǎn)動(dòng)物吸收利用,能代替魚(yú)粉補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)適合水產(chǎn)動(dòng)物采食,快速生長(zhǎng),特種水產(chǎn)代替魚(yú)
蛋白胨與胰蛋白胨的區(qū)別2023/01/06
一、蛋白胨(peptone)廣義的講是所有蛋白胨的總稱(chēng)。在國(guó)內(nèi)習(xí)慣把蛋白胨特指為蛋白胨(主要原料是牛骨),價(jià)格低廉;被廣大用戶(hù)用于要求不太高的實(shí)驗(yàn)和生物發(fā)酵中。進(jìn)口的蛋白胨沒(méi)有專(zhuān)指一個(gè)具體的一種蛋白胨,如:BD、OXOID、Pronadisa都會(huì)按照技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)和原料的不同進(jìn)行細(xì)分。蛋白胨(peptone)國(guó)產(chǎn)(狹義)是采用新鮮牛骨及牛肉混合提取,經(jīng)過(guò)消化、過(guò)濾、濃縮、噴霧干燥而得到的一種淺黃色至類(lèi)白色的干燥粉末。易溶于水,水溶液呈淡黃色。其不僅含有豐富的氨基酸,特別是含硫氨基酸較多,而且含有更多的
細(xì)胞凍存應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)?2023/01/05
1、凍存細(xì)胞的效果好壞要看細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存時(shí),細(xì)胞內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生晶體,水凝固形成的高濃度溶質(zhì)會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷,所以在凍存過(guò)程中要盡可能降低晶體的產(chǎn)生。為了提高復(fù)蘇存活率,可通過(guò)以下方法完成:a.降溫的速度不能太快,讓細(xì)胞內(nèi)的水分緩慢離開(kāi)細(xì)胞;b.在低溫環(huán)境下凍存細(xì)胞可以降低高濃度鹽對(duì)細(xì)胞中蛋白質(zhì)的影響;c.凍存試劑要采用親水的低溫保護(hù)劑;d.復(fù)蘇時(shí)的速度要快,這樣可以減少細(xì)胞內(nèi)部冰晶溶解時(shí)產(chǎn)生的某些可溶性成分。2、凍存細(xì)胞是為了留種,所以要選擇高濃度的細(xì)胞量進(jìn)行凍存。正常情況下,當(dāng)細(xì)胞濃
細(xì)胞爬片是什么2023/01/04
細(xì)胞爬片又名爬片,就是讓玻片浸在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi),細(xì)胞在玻片上生長(zhǎng),主要用于組織學(xué),免疫組織hua學(xué),冰凍切片,細(xì)胞涂片,原位雜交等,細(xì)胞爬片是根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究的需要,使貼壁細(xì)胞在一定的固相表面(如蓋玻片、載玻片)上貼壁生長(zhǎng)而獲得的一種體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)材料。我們?cè)谧雒庖邿晒猓↖F),激光共聚焦(Confocal),凋亡檢測(cè)(TUNEL)時(shí),免不了要制備細(xì)胞爬片,爬片質(zhì)量*決定了后拍照的質(zhì)量以及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的性。在醫(yī)學(xué)生物研究中,免疫熒光檢測(cè)等需用到細(xì)胞爬片?,F(xiàn)有的細(xì)胞爬片多采用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在
大鼠胰島素細(xì)胞的應(yīng)用2023/01/03
背景大鼠胰島素細(xì)胞源自大鼠胰島組織,胰島素陽(yáng)性,可合成胰島素原I和II,可用于胰島β細(xì)胞功能研究。胰腺的內(nèi)分泌部分,是分散在胰腺中的不規(guī)則的細(xì)胞群。胰島至少有三種細(xì)胞:A(或a2)細(xì)胞分泌胰高血糖素;B(或β)細(xì)胞分泌胰島素;近來(lái)又發(fā)現(xiàn)一種細(xì)胞,稱(chēng)為D(或δ或α1)細(xì)胞,它在正常情況下分泌生長(zhǎng)激素釋放抑制激素。D細(xì)胞增生或發(fā)生腫瘤時(shí),分泌大量胃泌素,稱(chēng)為胃泌素瘤??梢鹞杆岱置谶^(guò)多的消化性潰瘍。胰島這些細(xì)胞緊靠在毛細(xì)血管上,所分泌的激素,通過(guò)毛細(xì)血管壁滲入血液內(nèi),有調(diào)節(jié)糖代謝的作用。B細(xì)胞(β細(xì)
離心管如何選擇?2022/12/30
離心管是管狀試樣的容器,是實(shí)驗(yàn)室里比較常見(jiàn)的一種實(shí)驗(yàn)耗材,其作用主要是配合離心機(jī)用的。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是將實(shí)驗(yàn)液體裝在其中,然后放在離心機(jī)里面離心。,還適用于微生物和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的樣品制備,對(duì)于較大體積樣品或溶液保存,離心管也發(fā)揮著應(yīng)有的作用,包括在預(yù)混液和緩沖液的制備中也經(jīng)常出現(xiàn)它的身影。按照材質(zhì)的不同,一般分為塑料離心管、玻璃離心管、鋼制離心管,塑料的離心管在日常生活中使用的較多,又可以分為PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯)、PE(聚乙烯)等,我們?cè)诳紤]時(shí)盡可能的選用聚丙烯的塑料離心管。根據(jù)其大
一次性無(wú)菌吸管的使用方法2022/12/29
一次性抽吸移液管是一種用于準(zhǔn)確轉(zhuǎn)移一定體積溶液的量規(guī),一般是經(jīng)過(guò)特殊校準(zhǔn)的玻璃管或透明塑料管,用于盛裝準(zhǔn)確體積的要求流體。由透明聚合物聚苯乙烯制成,廣泛用于組織培養(yǎng)、細(xì)菌學(xué)等臨床和科研實(shí)驗(yàn)??纱蟠鬁p少液體對(duì)管壁的粘附,提高取樣精度;硬質(zhì)二元秤設(shè)計(jì)用于滿足加樣和減樣的要求。易讀刻度和附加容量負(fù)刻度,便于吸液讀數(shù);管端配有過(guò)濾元件和過(guò)濾塞,以防止反吸和溢出。測(cè)量準(zhǔn)確:每個(gè)容量的校準(zhǔn)率控制在±2%以?xún)?nèi)。使用時(shí)要按照以下步驟:1、使用前:使用一次性抽吸移液管時(shí),首先看移液器刻度、精度等級(jí)、刻度線位置等,
干貨-試劑盒好壞的鑒別辦法2022/12/28
現(xiàn)如今,ELISA試劑盒品種繁多,品牌多樣,使得科研者和經(jīng)銷(xiāo)商在選購(gòu)時(shí)眼花繚亂;ELISA試劑盒有好有壞,有真有偽,更讓我們無(wú)從下手。今日,我司將區(qū)別好壞ELISA試劑盒的四個(gè)辦法奉告我們,期望能對(duì)我們有所幫助。辦法一:選定一個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù),可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小,此操作時(shí)需求當(dāng)心加樣的性。對(duì)一些制造較粗糙的試劑盒來(lái)說(shuō),板間CV值是較大的。辦法二:可選用已知濃度的重組細(xì)胞因子,稀釋到檢測(cè)范圍內(nèi)作為樣本參加,看檢測(cè)的性。辦法三:對(duì)用待測(cè)目標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說(shuō)明書(shū)
吸頭分類(lèi)及知識(shí)普及2022/12/27
吸頭--又名槍頭、移液器吸嘴,屬于一次性的消耗品,用于任何分子生物學(xué)和基因?qū)W研究的應(yīng)用,其在移液器和樣品之間有效的形成保護(hù)結(jié)構(gòu),保證吸樣和分樣的安全性。容量范圍從10-5000ul.一般分為:滅菌與非滅菌兩種。但根據(jù)應(yīng)用場(chǎng)景可分為:1.常規(guī)吸頭2.濾芯吸頭3.低吸附吸頭4.自動(dòng)化吸頭5.疊盒吸頭(只能做無(wú)濾芯)6.聯(lián)盒吸頭(分為:五聯(lián)合和二聯(lián)盒)好的吸頭要看同心度、錐度、還有最為重要的一點(diǎn)就是吸附性;1.先來(lái)說(shuō)說(shuō)錐度:如果比較好的話和槍的匹配性就非常的好,吸液也會(huì)比較精準(zhǔn);2.同心度:同心度是吸
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