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2021
09-15

如何恢復(fù)HPLC色譜柱性能？
大家都知道HPLC色譜柱的壽命是有限的，在使用過程中隨著時間的推移，其性能開始下降。你可以通過峰形和峰形之間的分離，柱背壓的不規(guī)律增加以及重影峰的出現(xiàn)來判斷HPLC色譜柱的性能出現(xiàn)了下降。色譜柱是昂貴的色譜耗材，平常使用完畢后需要保養(yǎng)。如果色譜柱真的發(fā)生了性能下降，有什么方法可以恢復(fù)呢?首先，如果色譜柱由于過載或使用不兼容的流動相而結(jié)垢，是可以恢復(fù)的，但已經(jīng)損壞的色譜柱或已經(jīng)過使用壽命的色譜柱無法恢復(fù)，需要更換。色譜柱還原程序如下，供大家參考：反相柱反相分離是大多數(shù)HPLC分離中使用的主要操作模
2021
09-09

其實氣相色譜儀的應(yīng)用范圍還是很廣泛的
氣相色譜儀是指用氣體作為流動相的色譜分析儀器。其原理主要是利用物質(zhì)的沸點、極性及吸附性質(zhì)的差異實現(xiàn)混合物的分離。該色譜儀通常可用于分析土壤中熱穩(wěn)定且沸點不超過500°C的有機物，如揮發(fā)性有機物、多環(huán)芳烴、酞酸酯等，具有快速、有效、靈敏度高等優(yōu)點。氣相色譜（GC）是一種分離技術(shù)。實際工作中要分析的樣品往往是復(fù)雜基體中的多組分混合物，對含有未知組分的樣品，首先必須將其分離，然后才能對有關(guān)組分進(jìn)行進(jìn)一步的分析?；旌衔锏姆蛛x是基于組分的物理化學(xué)性質(zhì)的差異，GC主要是利用物質(zhì)的沸點、極性及吸附性質(zhì)的差異來
2021
09-07

液相色譜儀為什么會“漏液”和“漏氣”？恒譜生教你這些解決辦法！
液相色譜系統(tǒng)是一個封閉的系統(tǒng)，從最開始的溶劑瓶一直到最后的廢液瓶，期間是保持*封閉的，流動相在系統(tǒng)內(nèi)應(yīng)該是流動不會發(fā)生漏液或者外部氣體進(jìn)入系統(tǒng)內(nèi)部發(fā)生漏氣的現(xiàn)象。但是這是理想的液相系統(tǒng)，現(xiàn)實操作中還是會發(fā)生一些小問題、小故障從而產(chǎn)生漏液或者漏氣的現(xiàn)象。漏液的原因主要有以下幾種情況：（1）接頭處漏液一般是色譜柱接頭處漏液，可能是由于接頭損壞、松動、接口不匹配等情況而造成漏液。這時只要檢查接頭是什么問題，就差不多了。接口損壞可以替換新的，松動就擰緊，如果是不匹配的問題，最好是用色譜柱配套的接頭或者選
2021
08-31

高效液相色譜分析，如何避免堿性化合物的拖尾問題？
提起生物堿，制藥的小伙伴肯定不陌生，它是中草藥中最重要也*有價值的生物活性成分之一。生物堿可分為59種，它們的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，用傳統(tǒng)的方法分離效果不佳。高效液相色譜法還沒出現(xiàn)之前，對于生物堿的分離純化一直是學(xué)者們的難題。但是，即使使用液相色譜法分離，也會存在許多問題。堿性化合物分析中顯著的難題是峰形拖尾，而且堿性越強的時候，就越容易發(fā)生拖尾現(xiàn)象。恒譜生和你一起探討一下峰拖尾該如何避免！1、流動相調(diào)節(jié)流動相也可以改善峰拖尾的現(xiàn)象，前期在選擇流動相的時候，要考慮流動相pH值的范圍。對堿性化合物來說，流
2021
08-28

液相色譜發(fā)展都經(jīng)歷了啥？
液相色譜柱是液相色譜分析的核心，對于填料一直是色譜界研究的熱門項目。液相色譜柱的研究可謂是中原逐鹿，競爭十分激烈。液相色譜柱的發(fā)展都?xì)v經(jīng)了哪些變化呢？首先是柱子的柱體。從材質(zhì)上，一開始采用玻璃制作，但是我們都知道玻璃這種東西十分不耐壓，液相色譜分析的運行壓力越來越高，甚至現(xiàn)在還有超高壓液相色譜，用玻璃的柱體是十分不合適的?，F(xiàn)在的液相色譜柱的柱管幾乎都是用金屬制作了。通常采用不銹鋼材質(zhì)，具有高強度、高硬度的同時，不易生銹腐蝕、適用的溫度廣泛。恒譜生的液相色譜柱柱管就是采用不銹鋼材質(zhì)制作的。并且現(xiàn)在
2021
08-24

辟謠！一些關(guān)于HPLC和UHPLC 色譜柱的誤區(qū)
誤區(qū)1：HPLC柱不可以反沖這是不正確的。通常情況下液相色譜柱所設(shè)計的耐壓值是遠(yuǎn)高于最大操作壓力的。換柱時反沖可以清洗柱頭一些具有強吸附性質(zhì)的物質(zhì)，我們沖洗出這些殘留物質(zhì)也是為了防止壓力增大。但是如果你購買的色譜柱在柱頭使用了大粒度的填料，這時你反沖會沖出這一部分填料。因此你要先檢查一下自己使用的液相色譜柱再選擇是否反沖。誤區(qū)2：所有的C18（L1）色譜柱都是一樣的這是不正確的。在早期的HPLC體系中，C18是僅有的反向色譜的鍵合固定相，因此C18就作為了反向色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。但是時代不會一直停滯腳
2021
08-23

關(guān)于色譜填料，有哪些選擇呢
色譜填料技術(shù)又稱層析分離技術(shù)或色層分離技術(shù)，是一種分離復(fù)雜混合物中各個組分的有效方法。它是利用不同物質(zhì)在由固定相和流動相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù)，當(dāng)兩相作相對運動時，這些物質(zhì)隨流動相一起運動，并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，從而使各物質(zhì)達(dá)到分離。如今，色譜技術(shù)廣泛應(yīng)用于工業(yè)中尤其是食品藥品行業(yè)，高效液相色譜也逐漸成為了食品藥品實驗室檢測部門的標(biāo)配。在制藥行業(yè)，色譜層析制備柱也成了抗體、糖蛋白、抗生素等產(chǎn)品主要的生產(chǎn)設(shè)備。色譜填料的選擇要點有哪些呢？一、硅膠基質(zhì)填料硅膠是HPLC填料普遍的基質(zhì)
2021
08-10

在進(jìn)行HPLC分析之前，如何對生物樣品進(jìn)行脫蛋白處理？
恒譜生建議各位色譜操作者在進(jìn)行液相色譜分析前，關(guān)注樣品過濾的重要性，這是為什么呢？主要是為防止蛋白質(zhì)等雜質(zhì)沉積在色譜柱上，上柱前需對生物樣品進(jìn)行去蛋白的預(yù)處理。這樣可以延長色譜柱壽命并減少維護成本，從而有助于提高實驗室通量。脫蛋白對于分析生物液體（例如血漿，血清，尿液和腦脊髓液）中的抗生素，殘留農(nóng)藥含量等也起著非常重要的影響。并且如果不將沉淀的蛋白質(zhì)從樣品中去除，會導(dǎo)致色譜柱性能下降，最終影響色譜分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。生物樣品中去除蛋白質(zhì)的處理方法有3種：利用蛋白質(zhì)脫水沉淀。采用有機溶劑如乙腈、甲醇
2021
08-09

色譜柱填料方法有哪些呢，想知道的一起來看看吧
色譜柱填料技術(shù)呈現(xiàn)二大趨勢。一個趨勢是快速液相，利用亞2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢是越來越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，填充柱的柱效越高；小于3μm的填料應(yīng)用，在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是位一的因素。如果固定相選擇是真確，但是分離度不夠，那么選擇更小粒度的填料是很用有的，3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而，3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時，柱效提高意味著在相同條件下可以選
2021
08-06

液相色譜分析中，氣泡問題如何解決？
色譜工作者都知道，在液相色譜儀或者高效液相色譜儀工作時，不能有氣泡進(jìn)入系統(tǒng)，否則會出現(xiàn)諸如雜峰、壓力波動不穩(wěn)定和基線噪音等問題。通常對氣泡這種問題，要預(yù)先進(jìn)行處理，如果等到氣泡進(jìn)入系統(tǒng)想要處理，可就不那么容易了。對流動相進(jìn)行提前過濾和脫氣處理，這是一個比較好的解決辦法。大家可能會想，我選擇實驗分析的HPLC級溶劑還要過濾嘛？答案是：還是要過濾的！流動相過濾可以選擇溶劑過濾器，過濾掉里面的雜質(zhì)和避免空氣進(jìn)入系統(tǒng)里。恒譜生溶劑過濾頭可有效濾除流動相中的固體顆粒雜質(zhì)，不會產(chǎn)生氣泡，溶劑利用率達(dá)99%，
2021
08-04

液相色譜里理想的色譜峰長什么樣？
無論氣相色譜還是液相色譜，我們最終用來分析實驗結(jié)果的都是色譜峰。zui理想的色譜峰長什么樣呢？它長得如下圖所示，符合高斯分布的兩邊對稱的色譜峰是理想的峰形。而做色譜分析實驗就好像買彩piao，不是每次都有理想的實驗結(jié)果出現(xiàn)的。更多時候，總是會出現(xiàn)一些“奇奇怪怪”的峰型，比如峰拖尾、峰前延、倒峰、寬峰等。為什么會出現(xiàn)這樣的情況呢？要針對不同的峰型來具體分析。比如峰拖尾，這是比較常見的峰型，可能有以下幾種原因：色譜柱如果受到污染，會導(dǎo)致柱效下降，影響分析效果。如果等到發(fā)現(xiàn)柱頭污染了才來更換，費時費力
2021
07-19

液相色譜柱填料的種類與選擇原則
如果說色譜柱在液相色譜分析中的作用好比人的“大腦”，那么色譜填料就好比我們?nèi)说摹靶呐K”。液相分析結(jié)果好壞和準(zhǔn)確性，與填料有著非常重要的聯(lián)系。液相色譜填料的種類有很多，主要分為聚合物填料、硅膠基質(zhì)填料和其它無機填料。其中，硅膠基質(zhì)的填料被廣泛應(yīng)用于各種液相色譜分析中。硅膠填料有什么好處呢？硅膠基質(zhì)純度高，pH值通常在2-8之間，有些特殊的硅膠鍵合相的ph值可以穩(wěn)定在pH1.5-10。同時還具有比較高的比表面積，高比表面積具有較強的保留能力、柱容量和分離度；機械強度大，可以保證在超高壓的操作壓力下，
2021
07-19

親水相互作用色譜（hilic）是什么？
一種新的研究方法的誕生，大多是為了彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應(yīng)用問題，但對極性和親水性化合物很少或無法保留保留。如果使用正相液相色譜法，用己脘或環(huán)已脘來分析這些物質(zhì)也存在一些局限性，很多極性和親水化合物往往很難溶解，從而限制了NPLC的應(yīng)用范圍。在此基礎(chǔ)上，誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜（HILIC）。在HILIC色譜柱上，物質(zhì)的洗脫順序與RPLC恰恰相反，在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質(zhì)，在通常的實驗條件下，它們在HILIC柱上有較強的保留。恒譜生USH
2021
07-19

液相色譜柱該如何選擇？
可以說，色譜柱是色譜分析過程中最重要的部分，相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱，需要考慮不同參數(shù)將會造成什么影響，比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。即使是液相色譜柱也分很多類型，比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素，才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。在設(shè)定選擇樣品分析的HPLC方法時，首先需要根據(jù)化合物的分子量大小，極性大小等因素選擇合適的分離模式，在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式下去選擇合適的色譜柱
2021
07-19

hplc 固定相的都經(jīng)過的哪些變化？
色譜工作者都知道固定相的選擇對樣品的分離起著重要作用，不同類型的色譜采用的固定相也是不同的，正相色譜采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相)，反相色譜一般用非極性固定相（如C18、C8），離子交換色譜中的固定相是各種離子交換劑等。早期使用*泛的是10-15μm固定相的填料，到今天HPLC的固定相已經(jīng)從不規(guī)則顆粒發(fā)展到球形顆粒。HPLC固定相發(fā)展歷程：六十年代，薄殼型填料，分離效率提高；七十年代，穩(wěn)定化學(xué)鍵合固定相，高速、高效和更大樣品容量，應(yīng)用范圍擴充；八十年代，生物色譜填料；九十年代，高
2021
07-13

2020版《中國藥典》高效液相色譜法修訂了！恒譜生帶你快速了解！
制藥行業(yè)一直是高效液相色譜法的重點應(yīng)用領(lǐng)域，高效液相色譜法被廣泛運用于鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測定、體內(nèi)分析等藥物分析測試與藥物質(zhì)量分析方法的建立。比如用高效液相色譜法可以測定合成藥及其制劑的含量，消除藥物中的雜質(zhì)、制劑中的附加劑及共存藥物的干擾。《中華人民共和國藥典》（簡稱《中國藥典》）是藥品研制、生產(chǎn)、經(jīng)營、使用和監(jiān)督管理等均應(yīng)遵循的法定依據(jù)。所有國家藥品標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)符合中國藥典凡例及附錄的相關(guān)要求。2020版藥典對0512高效液相色譜法中的色譜條件參數(shù)的可調(diào)整項及可調(diào)整范圍做了詳細(xì)規(guī)定。固定相不得
2021
07-13

你知道uhplc操作中常見故障怎么解決嗎？
首先我們要知道UHPLC是什么，它的全稱是超高效液相色譜（Ultra-HighPerformanceLiquidChromatography），是色譜分離科學(xué)中的一個全新類別與新技術(shù)。在制造技術(shù)、擴散體積和耐受壓力方面進(jìn)行了優(yōu)化，采用小顆粒的固相，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量，最大限度的發(fā)揮色譜性能。色譜儀器作為一種精密儀器，一些不正確的操作或者忽視的實驗步驟，會導(dǎo)致儀器分析效果的不佳，甚至對儀器造成傷害。其中，最多出現(xiàn)的一些柱壓、漂移和峰型異常的問題，比如鬼峰、肩峰、峰型不準(zhǔn)等。故障1
2021
07-13

液相色譜法對食品標(biāo)簽的貢獻(xiàn)
中國有句古話“民以食為天”，在吃上面，中國人可謂是“花樣百出”?，F(xiàn)代快節(jié)奏的生活，很多年輕人忙于工作沒時間自己做飯，從而促進(jìn)了速食食品市場的蓬勃發(fā)展。有機構(gòu)數(shù)據(jù)顯示，淘寶、天貓平臺2020年方便速食市場總成交額達(dá)213億元，市場規(guī)?？捎^。《2021中國食品消費趨勢》顯示，2021年包裝食品、自熱食品、預(yù)制菜肴等品類仍將加速成長，代餐、功能食品等聚焦健康的細(xì)分品類將獲更多關(guān)注，整體消費市場持續(xù)革新。人們的生活水平不斷提高，不僅市民對食品安全及營養(yǎng)健康非常關(guān)注，國家對營養(yǎng)及食品問題也十分重視。衛(wèi)生部
2021
07-09

為什么hplc流動相溶劑要過濾和脫氣？
要回答這個問題，首先來了解一下什么叫流動相。簡而言之，流動相就是載體,將物質(zhì)帶到固定相里并通過固定相的流體。流動相可以是緩沖液與有機溶劑結(jié)合的水-有機混合物，也可以是有機-有機混合物。開始使用流動相溶劑進(jìn)行色譜分析前，一定要檢查溶劑是否*混溶，這是非常重要的，其次是要關(guān)注它們在混合時是否會相互反應(yīng)，如果發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，會影響流動相的使用和色譜的正確分析。有些色譜工作者可能會說，那我采用HPLC級溶劑可以直接使用嗎？恒譜生建議，即使是HPLC級溶劑也要在使用前進(jìn)行過濾！為什么呢？主要是有些懸浮顆?；?
2021
07-07

hplc在臨床實驗室中的潛在應(yīng)用有哪些？
高效液相色譜法在臨床實驗室中對不同體液中生物標(biāo)志物的分離和定量起了重要作用。HPLC與其他常規(guī)檢測器（例如UV，熒光和電化學(xué)檢測器）相比，更趨向于質(zhì)量敏感檢測。填充材料技術(shù)的進(jìn)步，例如亞微米表面多孔二氧化硅顆粒已經(jīng)被引入了超高壓液相色譜中，在不遇到高背壓的情況下提高了分離效率。高效液相色譜儀的系統(tǒng)壓力較高，色譜柱是產(chǎn)生系統(tǒng)壓力的主要部件，高背壓會影響很多方面比如反壓太高超過流通池的耐受壓力，會導(dǎo)致流通池的損壞。恒譜生液相色譜柱均一的粒徑保證了流動相穩(wěn)定的流動，并且確保色譜柱有著較低的柱壓。恒譜生

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