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2023
06-15

如何操作熒光素標記？
熒光素標記是一種常見的生物標記技術(shù)，可以將目標分子與熒光素結(jié)合，使其在熒光顯微鏡下可視化。它利用熒光素這種特殊的分子結(jié)構(gòu)，在外界激發(fā)下會發(fā)出熒光信號。在該標記中，熒光素通常通過共價鍵或非共價鍵與目標分子結(jié)合。當(dāng)標記后的分子受到熒光激發(fā)時，就會發(fā)出特定的熒光信號，從而被熒光顯微鏡可視化。熒光素標記的操作流程1.選擇適合的熒光素：不同的熒光素有不同的激發(fā)和發(fā)射波長，因此需要根據(jù)實驗需要選擇適合的熒光素。2.合成或購買熒光素標記物：該標記物可以通過化學(xué)方法合成或者購買商業(yè)化的產(chǎn)品。3.標記目標分子：標
2023
06-14

重點推薦丨高靈敏度炎癥相關(guān)IL-6配對抗體！
背景資料白介素6(Interleukin-6，IL-6)是一種由2條糖蛋白鏈組成的多肽，1條為α鏈，分子量80kd，另1條為β鏈，分子量130kd。α鏈缺少胞內(nèi)區(qū)，只能以低親合性與白介素6結(jié)合，所形成的復(fù)合物迅即與高親和性的β鏈結(jié)合，通過β鏈向細胞內(nèi)傳遞信息。白介素6是一種炎癥因子，是一種功能廣泛的多效性細胞因子，機體受炎癥刺激后由T細胞、B細胞、單核巨噬細胞及內(nèi)皮細胞等分泌，是炎癥介質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵成分。炎癥反應(yīng)發(fā)生后，白介素6生成，產(chǎn)生后誘導(dǎo)產(chǎn)生C-反應(yīng)蛋白(CRP)和降鈣素原(PCT)生成。如
2023
06-09

caspase-3抗體操作簡單，重復(fù)性好，效率高
caspase-3抗體是位于哺乳動物細胞凋亡通路下游關(guān)鍵的死亡蛋白酶。正常情況下，胞質(zhì)中的Caspase-3以無活性的酶原形存在，細胞凋亡信號的出現(xiàn)可導(dǎo)致Caspase-3裂解、活化，活化的Caspase-3又進一步導(dǎo)致蛋白酶級聯(lián)切割放大，最終使細胞走向死亡。因此Caspase-3表達量可以直接反映細胞凋亡程度。細胞凋亡程度Caspase-3是細胞凋亡過程中最關(guān)鍵的執(zhí)行分子(keyexecutioner)之一，可以剪切細胞凋亡過程中的許多關(guān)鍵蛋白，例如PARP。caspase-3抗體的激活需要從
2023
06-09

cck8檢測試劑盒與傳統(tǒng)的MTT實驗有何區(qū)別？
cck8檢測試劑盒細胞增殖與活性檢測試劑盒是一種基于SST-8的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽SST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)，SST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜。cck8檢測試劑盒被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養(yǎng)基中，細胞增殖越多越快，則顏色越深。細胞毒性越大，則顏色
2023
06-09

淺析培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項
1、配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2、的制備記錄每次制備均應(yīng)有記錄，包括名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，最終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，最好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)
2023
06-09

淺析熒光抗體在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用
熒光抗體技術(shù)在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學(xué)檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養(yǎng)物、感染組織、病人分泌排泄物等。本法較其他鑒定細菌的血清學(xué)方法速度快、操作簡單、敏感性高，但在細菌實驗診斷中，一般只能作為一種補充手段使用，而不能代替常規(guī)診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用
2023
06-09

清楚這些內(nèi)容，使用cck8檢測試劑盒不再是難題！
cck8檢測試劑盒為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。使用說明：一、制作標準曲線（測定細胞具體數(shù)量時（測定細胞具體數(shù)量時）1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，然后接種細胞。2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度
2023
06-09

培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌流程，一起來看看
1、定義：連續(xù)滅菌也叫連消，將配制好的并經(jīng)預(yù)熱（60～75℃）的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔，使在短時間內(nèi)達到滅菌溫度（126～132℃）。然后進入維持罐（或維持管），使在滅菌溫度下維持3～7分鐘后再進入冷卻管，使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先滅菌（空罐滅菌）過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126～132℃為宜，總蒸汽壓力要求達到0.044～0.049MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌時，需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前，直接用蒸汽進行空罐滅菌（空消），用無菌空氣保壓，待培養(yǎng)基流入罐后，開始冷卻。滅菌
2023
06-09

淺析熒光抗體技術(shù)檢測基本原理
某些熒光物質(zhì)在一定條件下，羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒既能與抗原或抗體結(jié)合。又不影響抗原與抗體的特異性結(jié)合。用熒光抗原或熒光抗體對待檢標本染色后，在熒光顯微鏡下觀察，可看到發(fā)出熒光的抗原抗體復(fù)合物。作為蛋白質(zhì)標記用的熒光物質(zhì)需具備如下條件：①有與蛋白質(zhì)分子形成穩(wěn)定共價鍵的化學(xué)基團，但不形成有害產(chǎn)物；②熒光效率高，與蛋白質(zhì)結(jié)合的需要量少；③結(jié)合物在一般條件下穩(wěn)定，結(jié)合后又不影響免疫活性；④作為組織學(xué)標記，結(jié)合物的熒光必須與組織的自發(fā)熒光有良好的反襯；⑤結(jié)合程序簡單，能制成直接應(yīng)用的商品
2023
06-09

如何選擇合適的HIS標簽抗體？這就來揭曉
His標簽抗體是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽，專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小，并且較容易分離和純化，His-tag融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優(yōu)勢，是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標簽融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位，以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。然而，目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多，且價格也十分昂貴。如何選擇合適的His標簽抗體？我們在選擇His抗
2023
06-09

淺析熒光素標記的生物素操作步驟
(一)獲得目的基因1、通過PCR方法：以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板，按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點)，PCR循環(huán)獲得所需基因片段。2、通過RT-PCR方法：用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA，以mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈，以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。(二)構(gòu)建重組表達載體1、熒光素標記的生物素載體酶切：將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切，酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后，用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。2、PCR
2023
06-09

蛋白標記的這些技術(shù)，都學(xué)會了嗎？
目前有多種蛋白標記技術(shù)來幫助我們研究感興趣的蛋白質(zhì)的豐度、位置、相互作用、翻譯后修飾、功能，乃至監(jiān)測活細胞中的蛋白質(zhì)運輸?shù)葐栴}。目前有多種類型的標記物和標記方式可供選擇，但是針對特定的應(yīng)用應(yīng)當(dāng)選擇適合的標記策略。代謝標記策略代謝標記策略是一種體內(nèi)標記方法，在這種方法中，細胞被“喂養(yǎng)”了化學(xué)標記的營養(yǎng)物，然后這些標記物被摻入新合成的蛋白質(zhì)、核酸或代謝物中。然后，我們可以收集細胞并分離這些分子以獲得細胞生物過程的全局視圖。蛋白同位素標記原理：蛋白同位素標記是一種經(jīng)典的蛋白示蹤和蛋白組學(xué)定量技術(shù)，用天
2023
06-09

哪些因素會影響培養(yǎng)基的滅菌效果？
培養(yǎng)基滅菌是否完整，影響因素很多，除了培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的種類和數(shù)量，滅菌溫度的高低，時間長短外，還取決于：1.營養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時，微生物被殺死的同時，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。2.微生物的耐熱性細菌芽孢的熱阻較大，滅菌所需要的時間取決于把細菌
2023
06-09

淺析細胞凋亡試劑盒使用注意事項
細胞凋亡試劑盒是用FITC標記的重組人AnnexinV來檢測細胞凋亡時出現(xiàn)在細胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細胞凋亡試劑盒?？梢允褂昧魇郊毎麅x、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進行檢測。細胞凋亡是指細胞在生長到一定階段及某些生理過程中，會受到多因素和機制的嚴格調(diào)控而進入死亡。這是一個動態(tài)的過程，會涉及一系列復(fù)雜的生化反應(yīng)，是一個需要酶參與的級聯(lián)反應(yīng)，同時也涉及不同基因的表達及調(diào)控、信號傳導(dǎo)。其中有幾項生理過程能被用來檢測凋亡的發(fā)生，因此多參數(shù)分析法對于準確檢測這一過程十分重要。同時，了解細胞死亡和存活
2023
06-09

蛋白標記及其在細胞信號通路中的應(yīng)用
細胞是生命的基本單位，具有很多不同的功能。這些功能包括維持生命、代謝物質(zhì)、修復(fù)組織以及傳遞信息等。要了解和研究細胞功能，我們需要了解它們?nèi)绾蜗嗷プ饔煤屯ㄐ?。蛋白標記是一種常見的工具，可幫助我們深入了解細胞內(nèi)發(fā)生的過程。蛋白質(zhì)是細胞的重要組成部分，也是細胞進行各種生物學(xué)功能的關(guān)鍵分子。蛋白標記是用來確定特定蛋白質(zhì)位置或表達水平的工具。通過使用該標記，科學(xué)家們可以更好地了解蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)的作用機制。該標記的類型包括熒光標記、酶聯(lián)免疫吸附法和放射性標記等。這些標記方法可用于標記單一蛋白質(zhì)或大量蛋白質(zhì)。
2023
06-07

LH配對抗體！
點擊上方藍字關(guān)注我們背景資料促黃體激素(Luteinizinghormone，LH)也叫黃體生成素、促間質(zhì)細胞激素，是腺垂體前葉細胞分泌的一種糖蛋白類促性腺激素，由α和β兩條多肽組成的異源二聚體，存在于人的血液和尿液中。對于女性來說，LH與促卵泡刺激素(FSH)共同作用促進卵泡成熟與排卵，使卵泡破裂形成黃體，并分泌雌激素和孕激素。LH的產(chǎn)生受下丘腦促性腺釋放激素的控制，同時受卵巢的正、負反饋調(diào)控。對于男性來說，LH的作用是促進睪丸間質(zhì)細胞的發(fā)育及睪酮的分泌。男性LH的正常值為1.24-8.62m
2023
06-07

重點推薦丨高靈敏度激素相關(guān)TSH配對抗體！
背景資料促甲狀腺激素(Thyrotropin，Thyroidstimulatinghormone，TSH)是腺垂體分泌的促進甲狀腺的生長和機能的激素。人類的TSH是一種含211個氨基酸的糖蛋白，糖類約占整個分子的15%，整個分子由α和β兩條多肽組成。TSH全面促進甲狀腺的機能，稍早出現(xiàn)的是促進甲狀腺激素的釋放，稍晚出現(xiàn)的為促進T3、T4的合成，包括加強碘泵活性，增強過氧化物酶活性，促進甲狀腺球蛋白合成及酪氨酸碘化等各個環(huán)節(jié)。TSH促進甲狀腺上皮細胞的代謝及胞內(nèi)核酸和蛋白質(zhì)合成，使細胞呈高柱狀增生
2023
05-12

重點推薦丨高靈敏度心肌標志物MYO配對抗體！
背景資料心梗三項包括肌紅蛋白、肌酸激酶同工酶以及肌鈣蛋白。肌紅蛋白（myoglobin,簡稱MYO或者Mb）是由一條多肽鏈和一個輔基血紅素構(gòu)成，包含153個氨基酸殘基，形狀呈緊密球形。肌紅蛋白主要存于橫紋肌（心肌、骨骼?。┘毎?，因其為小分子物質(zhì)，當(dāng)心肌細胞發(fā)生損傷時，Mb是較早進入血液的生物的標志物（比之更早的是心臟性脂肪酸結(jié)合蛋白H-FABP），其擴散入血的速度比CK-MBmass或cTnI更快。但因肌紅蛋白在骨骼肌中也有表達，故骨骼肌損傷時也可有大量肌紅蛋白釋放，其不具有心肌特異性。MYO
2023
05-11

重點推薦丨高靈敏度炎癥相關(guān)SAA配對抗體！
點擊上方藍字關(guān)注我們背景資料血清淀粉樣蛋白A(SerumamyloidproteinA，SAA)是一種高密度脂蛋白相關(guān)載脂蛋白，目前發(fā)現(xiàn)4種亞型(SAA1-SAA4)，其中SAA1、SAA2、SAA4由肝臟產(chǎn)生，SAA3則由巨噬細胞和脂肪細胞產(chǎn)生。SAA1和SAA2是急性時相蛋白，當(dāng)機體發(fā)生感染或損傷時，可在4-6h內(nèi)迅速升高約1000倍，當(dāng)機體清除病原體后又可迅速的降低至正常水平。SAA3基因在人體中由于有1個堿基插入，產(chǎn)生編碼位移，導(dǎo)致翻譯終止信號而不被轉(zhuǎn)錄。SAA4蛋白能夠持續(xù)表達，但不參
2023
04-21

重點推薦丨高靈敏度NT-proBNP配對抗體！
點擊上方藍字關(guān)注我們背景資料BNP(B-typenatriureticpeptide,B型利鈉肽)因最早從豬腦中分離而得，又被稱為腦利鈉肽(brainnatriureticpeptide)，但主要從心臟（特別是心室）釋放。在心肌細胞中合成的具有134個氨基酸的BNP原前體(pre-proBNP)，進入血液循環(huán)后降解為含有108個氨基酸的BNP前體(proBNP)。當(dāng)心肌張力增加和心肌缺血等刺激存在時，proBNP在活化酶的作用下裂解為由76個氨基酸組成的NT-proBNP和32個氨基酸所組成的B

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