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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
糖基化的新角色：如何在子宮內(nèi)膜中為胚胎著床鋪路？2025/06/12
【研究背景】胚胎植入是懷孕的關(guān)鍵步驟，發(fā)生在子宮內(nèi)膜處于“植入窗口期”時(shí)，此時(shí)子宮內(nèi)膜對(duì)胚胎具有最高的接受性。這一過(guò)程受卵巢類固醇激素（雌二醇和孕酮）的調(diào)控。然而，不孕問(wèn)題影響了眾多夫婦，盡管體外受精-胚胎移植技術(shù)已經(jīng)發(fā)展，但成功率仍然只有大約30%，失敗的原因主要與胚胎植入有關(guān)。因此，深入理解胚胎植入的分子機(jī)制對(duì)于提高不孕治療的成功率至關(guān)重要。糖基化作為蛋白質(zhì)的一種重要翻譯后修飾，其在細(xì)胞間相互作用中發(fā)揮關(guān)鍵作用，尤其是在胚胎植入過(guò)程中，特定的糖鏈結(jié)構(gòu)可能與胚胎與子宮內(nèi)膜的相互識(shí)別和附著密切相
小鼠胎鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)2025/06/12
1、取懷孕18天小鼠，采用頸椎脫臼法處死，75%乙醇全身浸泡消毒；2、超凈臺(tái)內(nèi)，無(wú)菌條件下取胚胎，放入解剖液中清洗3次；3、分離海馬腦區(qū)，解剖液沖洗3次；4、用彈簧剪將海馬剪成1mm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分鐘振蕩一次；5、去掉上清，加入種植液1終止消化，吹打10-15次，不能有氣泡，70um濾網(wǎng)過(guò)濾；6、計(jì)數(shù)；7、按4x10^4細(xì)胞/孔種入24孔板，37℃，5%CO2，95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5h；8、5h后更換為種植液2繼續(xù)培養(yǎng)；上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海
蛋白酶體可通過(guò)切割宿主蛋白生成AMPs直接對(duì)抗細(xì)菌感染2025/06/11
研究背景蛋白酶體是細(xì)胞內(nèi)負(fù)責(zé)降解泛素化蛋白質(zhì)的關(guān)鍵復(fù)合體，傳統(tǒng)認(rèn)知集中于其維持蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)的功能。然而，Goldberg等人的研究揭示了蛋白酶體在抗細(xì)菌天然免疫中的全新角色：通過(guò)切割宿主蛋白生成抗菌肽（AntimicrobialPeptides,AMPs），直接參與宿主防御。這一發(fā)現(xiàn)突破了蛋白酶體功能的傳統(tǒng)邊界，為理解天然免疫機(jī)制提供了新視角，并為開(kāi)發(fā)新型抗生素（尤其是針對(duì)多重耐藥菌）提供了潛在策略。研究?jī)?nèi)容1.蛋白酶體生成AMPs的假設(shè)驗(yàn)證：生物信息學(xué)預(yù)測(cè)：通過(guò)模擬蛋白酶體切割位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)15%-
荷葉堿通過(guò)HSP90AA1減輕癌性惡病質(zhì)誘導(dǎo)的小鼠肌肉wei縮2025/06/11
各位讀者好，今天為大家?guī)?lái)一篇使用整合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、分子對(duì)接、分子動(dòng)力學(xué)模擬（MD）、藥物親和力響應(yīng)靶點(diǎn)穩(wěn)定性（DARTS）、表面等離子共振（SPR）策略來(lái)研究荷葉堿（NF）在癌癥惡病質(zhì)（CC）中的作用、潛在靶點(diǎn)和機(jī)制的高分文章，是由石河子大學(xué)藥學(xué)院和北京大學(xué)天然與仿生藥物國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室團(tuán)隊(duì)2025年4月在JournalofCachexia,SarcopeniaａndMuscle發(fā)表的，題為“NuciferineAttenuatesCancerCachexia-InducedMuscleWasti
人外周血PBMC的CD4+ T細(xì)胞磁珠分選及流式鑒定2025/05/27
一、人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）的分離1.3ml抗凝血加入3ml1×PBS進(jìn)行稀釋。2.在15ml離心管內(nèi)加入3ml淋巴細(xì)胞分離液，再在液面上方平鋪3ml稀釋過(guò)的抗凝血，常溫下，水平離心機(jī)600g，離心30min。3.吸取中間白膜層細(xì)胞，加入15ml離心管中，再加入10ml1×PBS混勻，常溫下，1000rpm，離心10min，棄上清，每管加入2mlMACS緩沖液重懸細(xì)胞并計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞數(shù)量，每個(gè)樣本不超過(guò)107個(gè)細(xì)胞。4.2000rpm，離心3min，棄上清。二、磁珠分選1.每管加入40ul
小鼠過(guò)敏性鼻炎模型2025/05/26
1.6-8周齡雄性BALB/c小鼠；2.致敏階段：在第1、8和15天，通過(guò)腹腔注射300ul的混合液，其中包含50ugOVA和1mg氫氧化鋁溶于PBS中。3.激發(fā)階段：在第22天，開(kāi)始鼻內(nèi)激發(fā)。使用10mg/mL的OVA溶液，每側(cè)鼻孔滴入20μL，每天1次，連續(xù)激發(fā)7天。4.行為學(xué)評(píng)估：①撓鼻②打噴嚏③清水樣涕5.鼻粘膜的HE染色，有炎性細(xì)胞侵潤(rùn)。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)服
北京大學(xué)人民醫(yī)院胃腸外科團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)CTSD N-糖基化修飾影響結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移2025/05/19
研究背景：結(jié)直腸癌是全球五大致命癌癥之一，在中國(guó)是第二大常見(jiàn)惡性腫瘤。肝轉(zhuǎn)移是患者預(yù)后不良的主要原因，25%的患者初診時(shí)已有肝轉(zhuǎn)移，術(shù)后15%-25%因肝轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)，90%的肝轉(zhuǎn)移患者無(wú)法獲得有效治療，IV期患者5年生存率僅24%。N-糖基化修飾在蛋白質(zhì)的多種功能中起關(guān)鍵作用，且與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)，但目前關(guān)于結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)的N-糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)研究較少。研究方法：收集14例結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者的原發(fā)性病灶和配對(duì)肝轉(zhuǎn)移病灶樣本，經(jīng)處理后進(jìn)行液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）分析。對(duì)多種細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)，構(gòu)
棕櫚酰化調(diào)控 TNF 通路中的 RIPK1 激酶活性和細(xì)胞毒性2025/04/29
腫瘤壞死因子（TNF）是一種促炎細(xì)胞因子，對(duì)維持組織穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。它通過(guò)與TNF受體1（TNFR1）結(jié)合，激活炎癥相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄，調(diào)控絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）和核因子κB（NF-κB）通路，從而引發(fā)炎癥反應(yīng)。不過(guò)，TNF引發(fā)的細(xì)胞凋亡和壞死性凋亡也可能導(dǎo)致多種炎癥性疾病。受體相互作用絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶1（RIPK1）是TNF信號(hào)通路中的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，它能協(xié)調(diào)細(xì)胞的生存與死亡。RIPK1的支架功能可誘導(dǎo)炎癥和細(xì)胞存活，而其激酶功能則與凋亡和壞死性凋亡相關(guān)。近日，中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所生物
核糖基化調(diào)控胚胎發(fā)育速度2025/04/29
一、研究背景：胚胎發(fā)育中的“糖密碼”在生物學(xué)領(lǐng)域，蛋白質(zhì)功能受多種化學(xué)修飾調(diào)節(jié)，其中糖基化修飾備受關(guān)注。不同于復(fù)雜的細(xì)胞外糖鏈，O-GlcNAc（O-連接的N-乙酰葡萄糖胺）作為一種可逆的單糖修飾，廣泛存在于RNA聚合酶II、轉(zhuǎn)錄因子等關(guān)鍵蛋白上，以及在細(xì)胞內(nèi)數(shù)千種蛋白質(zhì)上發(fā)揮作用，涉及從糖酵解至細(xì)胞周期、轉(zhuǎn)錄及翻譯等眾多基礎(chǔ)細(xì)胞活動(dòng)，可能介導(dǎo)基因表達(dá)對(duì)環(huán)境變化的響應(yīng)。哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育階段，會(huì)經(jīng)歷諸多代謝變化且依賴O-GlcNAc修飾相關(guān)酶存活。此前研究發(fā)現(xiàn)，負(fù)責(zé)添加O-GlcNAc的酶OG
乳酸化修飾調(diào)控cGAS促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)2025/04/25
乳酸是糖酵解的最終產(chǎn)物，作為碳源和信號(hào)分子，為腫瘤發(fā)展提供代謝、微環(huán)境和免疫基礎(chǔ)。最近，乳酸被重新定義為表觀遺傳學(xué)的標(biāo)志，通過(guò)組蛋白修飾實(shí)現(xiàn)免疫重塑和腫瘤進(jìn)展。然而，大多數(shù)非表觀遺傳蛋白的乳酸化及其功能尚未被充分研究。先天免疫系統(tǒng)通過(guò)多個(gè)模塊組成的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)來(lái)響應(yīng)入侵或細(xì)胞損傷。乳酸通過(guò)直接與MAVS結(jié)合抑制RLR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，但乳酸對(duì)先天免疫反應(yīng)的胞質(zhì)DNA感應(yīng)的影響尚不清楚。cGAS被鑒定為感知胞質(zhì)DNA并觸發(fā)先天免疫反應(yīng)的關(guān)鍵酶，其活性和蛋白穩(wěn)定性受翻譯后修飾的調(diào)節(jié)。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（UP
復(fù)旦放射醫(yī)學(xué)研究所團(tuán)隊(duì)最新發(fā)文，揭示IFI16在GBM放射抗性中的作用機(jī)制2025/04/25
?研究背景膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（Glioblastomamultiforme,GBM）是一種高度侵襲性的WHOIV級(jí)腦部惡性腫瘤。近年來(lái)的研究表明，膠質(zhì)瘤在治療過(guò)程中可能表現(xiàn)出從新生腫瘤到老化腫瘤的演變趨勢(shì)，提示細(xì)胞衰老可能在GBM治療中發(fā)揮作用。然而，細(xì)胞衰老在腫瘤中的作用復(fù)雜，一方面可能抑制腫瘤，另一方面可能通過(guò)衰老相關(guān)分泌表型（SASP）促進(jìn)腫瘤復(fù)發(fā)和抗藥性。細(xì)胞衰老（Senescence）是一種細(xì)胞周期停滯狀態(tài)，通常被認(rèn)為具有抗腫瘤作用。然而，越來(lái)越多的證據(jù)表明，放療和化療可能誘導(dǎo)腫瘤中衰老細(xì)胞
乳腺癌治療新靶點(diǎn)——CLDN6與鐵死亡的“愛(ài)恨糾葛”2025/04/17
研究背景鐵死亡（Ferroptosis）是一種由鐵依賴性脂質(zhì)過(guò)氧化驅(qū)動(dòng)的調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡形式，近年來(lái)被證實(shí)與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，特別是在腫瘤領(lǐng)域。鐵死亡的調(diào)控涉及多個(gè)因素，其中NRF2是一個(gè)關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄共激活因子，通過(guò)調(diào)控其靶基因（如GPX4）來(lái)抑制鐵死亡。此外，CLDN6（緊密連接蛋白6）作為一種重要的腫瘤抑制因子，在乳腺癌中的表達(dá)下調(diào)，且與鐵死亡的關(guān)聯(lián)尚未明確。本研究旨在深入探討CLDN6與鐵死亡之間的聯(lián)系，并揭示其在乳腺癌中的潛在調(diào)控機(jī)制，以期為乳腺癌的預(yù)后預(yù)測(cè)和治療提供新的視角和靶點(diǎn)
什么是泛素化修飾？2025/04/17
真核細(xì)胞中的蛋白質(zhì)翻譯加工主要有兩條途徑，一條是信號(hào)肽引導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體途徑，即分泌途徑，另一條是游離核糖體途徑。前者包括分泌蛋白、膜蛋白和溶酶體蛋白，后者主要是胞漿蛋白、核蛋白和一些細(xì)胞器蛋白。分泌途徑的翻譯主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)完成，而另一條途徑是在游離核糖體上完成翻譯，然后被特異定位標(biāo)簽引導(dǎo)進(jìn)入線粒體、葉綠體、過(guò)氧化物酶體及細(xì)胞核等處，沒(méi)有標(biāo)簽的就留在胞漿。2004年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)?lì)C發(fā)給以兩名色列和一名美國(guó)科學(xué)家，以表彰他們發(fā)現(xiàn)了泛素調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)降解，從此拉開(kāi)了研究生物體泛素化修飾的序幕；泛素（U
小鼠腸組織瑞士卷標(biāo)本制備2025/04/17
瑞士卷技術(shù)有助于完整的腸或結(jié)腸切片進(jìn)行組織學(xué)評(píng)估，區(qū)分腸道結(jié)構(gòu)特征；進(jìn)而定量測(cè)量腸道炎癥和腫瘤。這種技術(shù)非常適合于綜合評(píng)估腸上皮的組織病理學(xué)和分子特征。1.麻醉C57BL/6小鼠。2.切開(kāi)腹部皮膚和肌肉，暴露腹腔。3.鑒定盲腸和回腸，在盲腸上部取回腸一段，確認(rèn)好遠(yuǎn)側(cè)端和近側(cè)端。4.剪開(kāi)回腸，用蘸生理鹽水的棉簽去除腸內(nèi)容物。5.用眼科鑷，從回腸的遠(yuǎn)側(cè)端向近側(cè)端折疊。6.用4號(hào)針頭固定折疊后的回腸。7.折疊后的回腸放到4%多聚甲醛固定液中。8.24h后，用自動(dòng)脫水機(jī)脫水，然后石蠟包埋，切片。9.HE
表觀轉(zhuǎn)錄因子 PCIF1 調(diào)控 CD8+ T 細(xì)胞鐵死亡與激活2025/04/01
《TheepitranscriptionalfactorPCIF1orchestratesCD8+Tcellferroptosisａndactivationtocontrolantitumorimmunity》是2025年發(fā)表在《NatureImmunology》上的一篇文章，PCIF1是一種表觀轉(zhuǎn)錄因子，通過(guò)調(diào)控RNA的m6Am修飾，在CD8+T細(xì)胞的抗腫瘤免疫反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。研究發(fā)現(xiàn)，PCIF1在CD8+T細(xì)胞中具有抑制性作用，其缺失能夠增強(qiáng)T細(xì)胞的抗腫瘤活性，從而提高免疫治療的效果。一
肝臟再生新突破！科學(xué)家發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞的“秘密wu器”——谷氨酸2025/04/01
【研究背景：肝臟再生的“謎題”】肝臟是人體wei一具有強(qiáng)大再生能力的器官，即使切除70%，也能在幾周內(nèi)恢復(fù)如初。但這一過(guò)程如何精準(zhǔn)調(diào)控？哪些細(xì)胞和分子在幕后“指揮”？長(zhǎng)期以來(lái)，科學(xué)界對(duì)肝臟再生的機(jī)制存在爭(zhēng)議。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為，肝臟中的“干細(xì)胞樣”細(xì)胞（如中央靜脈周圍的zone3肝細(xì)胞）是再生的主力軍。但最新研究發(fā)現(xiàn)，中央靜脈附近的肝細(xì)胞通過(guò)釋放谷氨酸，竟然能遠(yuǎn)程“指揮”另一種免疫細(xì)胞——巨噬細(xì)胞，成為肝臟修復(fù)的“核心引擎”。這項(xiàng)研究由西班牙國(guó)立癌癥研究中心團(tuán)隊(duì)完成，成果發(fā)表于《自然》雜志?！狙芯糠椒?
大鼠卵母細(xì)胞的采集及發(fā)育分型2025/04/01
大鼠超排可以用于研究環(huán)境污染物或藥物對(duì)生殖系統(tǒng)的毒性影響；通過(guò)誘導(dǎo)超排并觀察卵母細(xì)胞和胚胎的發(fā)育情況，可以評(píng)估潛在的生殖毒性。大鼠卵母細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程可以分為3個(gè)階段：GV期、MI期、MⅡ期。方法1.雌性SD大鼠，腹腔注射PMSG60IU，注射PMSG46-48h后，腹腔注射hCG20IU，誘導(dǎo)超排。2.準(zhǔn)備卵母細(xì)胞培養(yǎng)滴：在60mm培養(yǎng)皿內(nèi)做若干水滴狀的滴，并用礦物油覆蓋，放入培養(yǎng)箱（37℃、5%CO2）平衡4h以上（推薦過(guò)夜平衡）。3.卵母細(xì)胞采集的時(shí)間通常在SD大鼠注射hCG后13-16h內(nèi)
大鼠股骨、脛骨、腓骨的剝離方法2025/03/28
大鼠股骨、脛骨和腓骨的剝離在生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域，如用于分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs），這些細(xì)胞在組織工程和再生醫(yī)學(xué)中具有重要應(yīng)用。以下是詳細(xì)的剝離方法。1.將大鼠腹腔注射戊ba比妥鈉進(jìn)行麻醉，確保大鼠wan全失去反應(yīng)。2.將麻醉后的大鼠固定在手術(shù)板上，四肢用膠帶固定，腹部向上。3.用碘伏棉球擦拭大鼠后肢，確保手術(shù)區(qū)域無(wú)菌。4.皮膚切開(kāi)，使用手術(shù)剪刀從踝關(guān)節(jié)上方約1cm處開(kāi)始，沿后肢外側(cè)向上剪開(kāi)皮膚，直至股骨頭。5.肌肉分離，從踝關(guān)節(jié)處逐步分離附著在脛骨和腓骨上的肌肉。6.wan
細(xì)胞“自噬”的新秘鑰：看“棕櫚?；比绾谓怄i自噬體形成的奧秘2025/03/21
研究背景自噬是細(xì)胞內(nèi)一種通過(guò)雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬體包裹并降解細(xì)胞質(zhì)成分（如錯(cuò)誤折疊蛋白、損傷細(xì)胞器和入侵微生物）的降解途徑，對(duì)維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、細(xì)胞發(fā)育、免疫反應(yīng)和細(xì)胞死亡至關(guān)重要，其失調(diào)與癌癥、糖尿病和神經(jīng)退行性疾病相關(guān)。自噬體的形成由ATG蛋白調(diào)控，其中ATG16L1是關(guān)鍵蛋白，它與ATG12-ATG5結(jié)合形成復(fù)合物，催化LC3脂化，促進(jìn)自噬體形成，并參與細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌隔離、線粒體自噬及炎癥調(diào)節(jié)。S-棕櫚?；且环N可逆的翻譯后修飾，通過(guò)在半胱氨酸殘基上添加棕櫚酰基團(tuán)，影響蛋白質(zhì)相互作用和膜結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞
大鼠腦組織、松果體、垂體、海馬的取材 及注意事項(xiàng)2025/03/19
1.續(xù)第四集，取腦組織。2.碘伏消毒。3.沿顱后與頸椎之間斷頭，沿顱頂正中切開(kāi)頭皮去除軟組織。用止血鉗自枕骨大孔處逐步去除顱頂骨，充分暴露腦組織。4.小心去除腦膜，暴露松果體。5.松果體位于兩大腦半球和小腦之間，是一個(gè)發(fā)紅或黃褐色的卵圓形小體。6.用鑷子輕輕撥動(dòng)嗅球及大腦半球的邊緣，小心地將其從顱腔中取出。7.垂體為卵圓形小體，與垂體窩結(jié)合緊密，用頭端鈍圓的細(xì)鑷小心分離。8.海馬位于大腦的顳葉內(nèi)側(cè)，是邊緣系統(tǒng)的重要組成部分，屬于海馬結(jié)構(gòu)。海馬位于側(cè)腦室下角的內(nèi)側(cè)壁，外形類似海馬狀的隆起。9.海馬
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