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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
小鼠脾臟單細(xì)胞懸液的制備方法2024/06/14
1.8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。2.在75%的酒精中，浸泡5min。3.無(wú)菌狀態(tài)下取脾臟。4.取一干凈10cm大皿，放入無(wú)菌的70um濾網(wǎng)，將脾臟置于濾網(wǎng)上，加入2ml培養(yǎng)基。5.用研磨棒輕輕研磨臟器，將脾臟組織研磨成單細(xì)胞狀態(tài)，直到只剩下臟器的結(jié)締組織為止。6.研磨時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，用力過(guò)大可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。7.棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結(jié)締組織，收集平皿內(nèi)的細(xì)胞懸液，400g4min離心沉淀。8.用PBS重懸沉淀，就可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的小鼠模型2024/06/14
一、動(dòng)物雌性C57小鼠，體重20±2g。二、造模方法麻醉小鼠，從背部皮膚上刮下毛發(fā)并擦洗。使用過(guò)氧化氫（5%）每天涂抹兩次，持續(xù)6周，在此期間，允許小鼠正常飲食。正常對(duì)照組小鼠涂抹蒸餾水。三、模型驗(yàn)證在最后一次涂藥12小時(shí)后，犧牲小鼠，取血和皮膚。皮膚的HE染色病理分析等。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包
半胱胺誘導(dǎo)的大鼠十二指腸潰瘍模型2024/06/14
一、動(dòng)物雄性Wistar大鼠，重量200–250g。二、造模方法用生理鹽水制備半胱胺（Cysteamine）酸溶液，濃度為10%。大鼠在標(biāo)準(zhǔn)條件下飼養(yǎng)，自由獲取食物和水。在實(shí)驗(yàn)前24h，禁食，但是水自由攝取，大鼠飼養(yǎng)在地板是鐵絲網(wǎng)的籠子中。在早晨8點(diǎn)和中午12點(diǎn)時(shí)，對(duì)照組大鼠灌胃給予生理鹽水（1ml/kg）,模型組大鼠灌胃給予半胱胺酸溶液（450mg/kg）。在最后一次給藥后24h，大鼠處死，取血和十二指腸。三、模型驗(yàn)證檢查十二指腸潰瘍，病理分析。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，
阿司匹林誘導(dǎo)的大鼠胃潰瘍模型2024/06/14
一、動(dòng)物健康成年Wistar大鼠，重量100-120g。二、造模方法阿司匹林溶解在2%阿拉伯膠溶液中。大鼠適應(yīng)環(huán)境一周后，對(duì)照組大鼠口服10ml/kg的2%阿拉伯膠，模型組大鼠口服200mg/kg的阿司匹林，每天一次，連續(xù)7天。在第8天禁食18h后，處死大鼠。三、模型驗(yàn)證沿著胃大彎打開(kāi)大鼠的胃，在解剖顯微鏡下觀察粘膜是否有潰瘍。通過(guò)組織病理學(xué)檢查胃粘膜水腫、壞死和潰瘍深度。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢
TDI誘導(dǎo)的大鼠過(guò)敏性鼻炎模型2024/06/14
一、動(dòng)物Wistar大鼠，重量250-300g。二、造模方法10ul的10%的甲丨苯-2.4-異氰酸酯（toluene-2,4-iso-cyonate,TDI）滴在大鼠雙側(cè)鼻前庭內(nèi)，每天一次，連續(xù)5天。間隔三周后，10ul的10%的TDI滴在大鼠雙側(cè)鼻前庭內(nèi)，每天一次，連續(xù)5天。一周后，10ul的5%的TDI滴在大鼠雙側(cè)鼻前庭內(nèi)，隔天一次，連續(xù)四周。對(duì)照組大鼠同樣的程序滴注溶劑。三、模型驗(yàn)證大鼠每次滴注5%的DTI后，觀察30min內(nèi)的行為，例如打噴嚏、鼻涕、抓撓行為等的變化。HE染色和免疫組化
整體課題實(shí)驗(yàn)2024/05/24
一、整體課題實(shí)驗(yàn)的意義在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，每一次的突破都離不開(kāi)深入的實(shí)驗(yàn)研究。而整體課題實(shí)驗(yàn)，作為一種綜合性、系統(tǒng)性的研究方法，正日益受到科研人員的青睞。它不僅能夠深入剖析疾病的發(fā)病機(jī)制，還能為藥物的研發(fā)提供有力支持，為醫(yī)學(xué)事業(yè)的進(jìn)步注入新的活力。整體課題實(shí)驗(yàn)，顧名思義，是一種將多個(gè)相關(guān)課題整合在一起，進(jìn)行系統(tǒng)性研究的實(shí)驗(yàn)方法。它突破了傳統(tǒng)單一課題研究的局限性，通過(guò)整合不同領(lǐng)域的知識(shí)和技術(shù)，形成一個(gè)更為完整、全面的研究體系。這種方法的出現(xiàn)，不僅提高了研究效率，也為科研人員提供了更廣闊的思路和視角。在整體
醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)2024/05/23
一、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的意義醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)是生命科學(xué)研究中重要的一環(huán)。無(wú)論是新藥研發(fā)、疾病診斷，還是基因測(cè)序、細(xì)胞培養(yǎng)，都離不開(kāi)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的支持。這些服務(wù)提供了專業(yè)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)、設(shè)備和人員，為科研人員提供了強(qiáng)大的后盾，使得他們能夠更專注于探索生命科學(xué)的奧秘。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的優(yōu)勢(shì)在于其專業(yè)性和高效性。專業(yè)的實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)具備豐富的經(jīng)驗(yàn)和技能，能夠確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。他們熟悉各種實(shí)驗(yàn)方法和技巧，能夠根據(jù)研究需求制定合適的實(shí)驗(yàn)方案。同時(shí)，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)還具備高效性，能夠快速響應(yīng)科學(xué)家的需求，提供及時(shí)的技術(shù)支持和數(shù)
醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的定義與范疇2024/05/23
引言：隨著科技的飛速發(fā)展，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)成為了推動(dòng)醫(yī)療進(jìn)步的重要因素。它不僅為疾病的預(yù)防、診斷和治療提供了強(qiáng)有力的支持，更是保障公共健康和促進(jìn)生命科學(xué)發(fā)展的重要基石。一、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的定義與范疇醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)是指在嚴(yán)格的科學(xué)規(guī)范和倫理指導(dǎo)下，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室研究和臨床試驗(yàn)等手段，對(duì)藥物、治療方法、醫(yī)療器械等進(jìn)行安全性、有效性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)的一系列活動(dòng)。這些服務(wù)包括但不限于新藥研發(fā)、生物標(biāo)志物的鑒定、疾病模型的構(gòu)建以及個(gè)性化醫(yī)療的研究等。二、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的重要性1.促進(jìn)新藥發(fā)現(xiàn)：通過(guò)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)，可以加速新
大鼠尾靜脈注射方法2024/05/23
1.用固定裝置固定大鼠，將尾巴露出。2.使用酒精棉球擦拭消毒大鼠尾巴，擴(kuò)張血管。3.用1ml注射器。4.用左手拇指和食指固定住尾巴，在尾巴的下1/4處進(jìn)針，針頭與尾巴平行，進(jìn)針時(shí)，針頭斜面朝上。5.回抽看血液是否回流，以確保針頭在血管內(nèi)。6.注射完成后，用干棉球按壓注射部位1-2分鐘以止血。注意事項(xiàng)：1.固定大鼠也要固定尾巴。2.推注藥物時(shí)，如果有阻力或白色皮丘出現(xiàn)，則意味著針頭未刺入血管，此時(shí)應(yīng)更換位置。3.多次注射，要從尾巴遠(yuǎn)端開(kāi)始注射。
大鼠腹腔注射方法2024/05/23
1.大鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側(cè)1cm處。2.左手固定大鼠，使腹部向上，讓大鼠頭處于低位。3.注射位置消毒4.右手持連有5號(hào)針頭的注射器。5.將注射器沿45°角斜向穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹腔，此時(shí)有落空感，回抽無(wú)回血或尿液，即可注入藥液。6.緩慢抽出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項(xiàng)1.注射時(shí)，大鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。
小鼠腹腔注射方法2024/05/23
1.小鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側(cè)0.5cm處。2.首先采用背側(cè)保定法抓取小鼠，使其頭部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住。3.再用75%酒精棉球消毒注射部位。4.將注射器針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔，回抽針?biāo)?，如無(wú)回血或液體即可注入藥物。5.注射后，緩慢拔出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項(xiàng)1.注射時(shí)，小鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。
小鼠尾靜脈注射方法2024/04/30
1.用專用固定裝置固定小鼠，前部有氣孔保障小鼠呼吸，后部將尾巴露出。2.小鼠尾靜脈左右兩條，使用酒精棉球擦拭消毒尾巴，擴(kuò)張血管。3.用1ml注射器，4號(hào)針頭。4.用左手拇指和食指固定住靠近尾部末端約1/3處。5.右手持注射器，針尖斜面朝上，沿與靜脈平行方向進(jìn)針。6.輕推針?biāo)?，如無(wú)阻力，即可注射藥物。7.拔出針頭前，先用干棉球按壓止血。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專
缺血性面癱動(dòng)物模型構(gòu)建2024/04/25
1.豚鼠重量220-300g，Preyer反射陽(yáng)性。2.適應(yīng)性飼養(yǎng)5天后，阻斷左耳巖動(dòng)脈，手術(shù)過(guò)程如下。3.用戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉豚鼠，動(dòng)物俯臥位。4.沿耳廓前上基底切開(kāi)皮膚，暴露顳肌。5.翻開(kāi)顳肌暴露顳骨鱗部（上鼓室氣房的外側(cè)壁）。6.用牙科鉆小心打開(kāi)上鼓室氣房的外側(cè)壁，暴露上鼓室氣房。7.以錘砧復(fù)合體和上半規(guī)管隆凸為骨性標(biāo)志，確認(rèn)面神經(jīng)管和巖動(dòng)脈的部位。8.巖動(dòng)脈走行于巖骨嵴內(nèi)，用小型牙科鉆輕輕鉆除巖動(dòng)脈上方的骨質(zhì)。9.以看見(jiàn)點(diǎn)狀出血為巖動(dòng)脈鉆出的標(biāo)志，即巖動(dòng)脈阻斷。10.術(shù)畢，縫合切口。
小鼠顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型的建立2024/04/25
1.雄性C57BL/6小鼠，10周齡。2.小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，行左頸總動(dòng)脈和右腎動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)。3.常規(guī)麻醉消毒后，分離左側(cè)頸總動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎，然后縫合頸部皮膚。4.腹部右側(cè)消毒后，分離右腎動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎，然后關(guān)腹；待小鼠蘇醒后放回飼養(yǎng)籠繼續(xù)飼養(yǎng)。7.一周后，麻醉小鼠，固定在立體定位儀上，暴露顱骨，確認(rèn)Bregma點(diǎn)。8.在Bregma點(diǎn)前1.2mm、右側(cè)0.7mm的位點(diǎn)轉(zhuǎn)孔，顱平面下深度4.7mm的位置注射彈性蛋白酶到大腦基底池。9.彈性蛋白酶以0.5μl/min的速度，注射2.5μl（35mU），
腦積水大鼠模型的建立2024/04/25
1.雄性SD大鼠、8周齡，戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉。2.大鼠頭頸部皮膚去毛后，固定在立體定位上，常規(guī)消毒。3.在頸部后面的皮膚上做一個(gè)中線切口，鈍性分離肌肉，暴露寰枕膜。4.微量注射器進(jìn)入寰枕膜失去阻力后停針，注入0.02mL無(wú)菌高嶺土懸浮液。5.注射速度6ul/s，注射后停針10min。6.拔針后，用醫(yī)用耳腦膠封閉針眼，縫合切口，術(shù)后抗感染治療。7.術(shù)后每天給大鼠稱重并監(jiān)測(cè)其神經(jīng)功能缺陷。8.大鼠術(shù)后3周，經(jīng)MRI檢查確認(rèn)模型成功后，取其腦組織，4%多聚甲醛固定。9.常規(guī)HE染色，光鏡觀察，可看
小鼠腦缺血再灌注損傷模型構(gòu)建2024/04/25
1.體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5%異氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5%異氟醚維持麻醉。在頸部中線切開(kāi)一個(gè)切口。2.分離右側(cè)的頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)。右側(cè)的頸總動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎。3.分離右側(cè)的頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈，右側(cè)的頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎；右側(cè)的頸外動(dòng)脈頭端結(jié)扎，近心端掛線備用。4.隨后，用無(wú)菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動(dòng)脈上做一個(gè)小洞，然后插入線栓，近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動(dòng)脈的線栓，以防止血從小洞中流出；松開(kāi)右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線，輕輕送入線栓到大腦中動(dòng)脈，當(dāng)感覺(jué)到阻力時(shí)停止，系
小鼠心肌梗死模型2024/04/13
雄性C57/B6小鼠小鼠常規(guī)麻醉，左胸前部剃毛，消毒。在左胸上方，做一個(gè)小的皮膚切口（1.2cm），并進(jìn)行荷包縫合，然后分離胸大肌和胸小肌后，暴露第4肋間間隙。在第4肋間間隙，用一個(gè)蚊式止血鉗打開(kāi)胸膜和心包；用夾子略微打開(kāi)，心臟平穩(wěn)而輕柔地從孔中“彈出”?？p合和結(jié)扎距左冠狀動(dòng)脈前降支起點(diǎn)約3mm的位置；左心室前壁變得蒼白，結(jié)扎被認(rèn)為是成功。結(jié)扎后，立即將心臟放回原位，然后手動(dòng)排空空氣，關(guān)閉肌肉和胸腔皮膚，通過(guò)先前放置的荷包線縫合。在3-5分鐘內(nèi)完成上述過(guò)程。記錄小鼠心電圖，將針電極插入四肢皮下作
LPS誘導(dǎo)急性肺損傷模型2024/04/13
脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要生物活性成份，已廣泛用于誘導(dǎo)急性肺損傷模型。此模型與人類急性肺損傷的病理特征相似。BALB/c小鼠，18-20g。小鼠常規(guī)麻醉后，模型組氣道內(nèi)滴注3mg/kgLPS(Escherichiacoli055:B5;Sigma)，溶解在50μl的生理鹽水中，對(duì)照組小鼠氣管內(nèi)滴注等體積的生理鹽水。藥物進(jìn)入氣道后，立即通過(guò)直立旋轉(zhuǎn)等手段，使藥物均勻分布在肺組織。24小時(shí)后，小鼠犧牲，取血、肺泡灌洗液和肺組織。肺組織做H&E染
大鼠灌胃操作2024/04/13
一、用左手固定大鼠的頭部，使其頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進(jìn)入口腔。二、將灌胃針從大鼠的左側(cè)嘴角插入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進(jìn)，進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感。三、在灌胃針插入過(guò)程中，應(yīng)緊貼咽后壁進(jìn)針，避免損傷食道。若灌胃針進(jìn)入氣管，大鼠會(huì)劇烈掙扎。四、觀察大鼠的反應(yīng)，如無(wú)過(guò)度掙扎，可嘗試推注藥物。如阻力過(guò)大或動(dòng)物反應(yīng)劇烈，可退針后插入。五、一般灌胃針插入深度：大鼠4-6cm。六、一次灌胃量：大鼠1-2ml/100g。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)
小鼠灌胃操作2024/04/13
一、左手固定小鼠，確保其身體成一直線，頭部固定，避免活動(dòng)。二、灌胃針從小鼠左側(cè)嘴角進(jìn)入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進(jìn)，進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感。三、在灌注藥液時(shí)需注意小鼠是否有強(qiáng)烈掙扎現(xiàn)象。四、一般灌胃針插入深度：小鼠2-3cm。五、一次灌胃量：0.1-0.2ml/10g。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)
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