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上海達(dá)為科生物科技有限公司
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大鼠骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)方法2024/03/28
1.SD大鼠,250g,通過頸椎脫位處死大鼠,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.打開皮膚,暴露、收集股骨,無菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。3.并轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中,洗滌三次。冰上操作。4.切斷股骨骨骺,使用5mlPBS,1ml注射器針頭沖洗,沖洗液由棕色變成粉紅色即可(股骨變白)。沖洗后,用1ml注射器吹打3-5次。5.70um濾網(wǎng)過濾,棄去篩網(wǎng)。使用15ml離心管,先加入分離液,然后緩慢加入濾過的懸液。20℃環(huán)境下,600g離心25min。6.離心后,離心管中
成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)2024/03/28
1.C57小鼠,8-10周,通過頸椎脫位處死,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.使用眼科剪和鑷子,使髖關(guān)節(jié)脫臼,保持股骨頭完整。3.用止血鉗去除每個股骨頭的軟骨帽,將組織放入含2%雙抗的PBS中。4.用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍,將關(guān)節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。5.用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片,加入3ml預(yù)熱的CollagenaseD(1.5mg/ml)。6.放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第一次消化,時間2h。7.第一次消化結(jié)束后,加入含血清的培養(yǎng)
新生小鼠原代心肌成纖維細(xì)胞的分離與培養(yǎng)2024/03/28
1.準(zhǔn)備0-1天內(nèi)的C57BL/6J小鼠新生鼠。2.用溫的無菌去離子水,輕輕擦拭每只新生鼠。3.用70%的乙醇去除新生鼠身體上的污染物。4.斷頭,取心臟,心臟置于冰的PBSG溶液中。5.除去血液和非心臟組織。6.剪碎心臟組織。7.加入胰酶-膠原酶消化液,每只新生鼠75ul。8.在37°C的搖床培養(yǎng)箱中,以250rpm/5min,消化心肌組織。9.輕輕渦旋,然后離心10秒,丟棄第一次消化的上清液。10.開始第二次消化,250rpm/5min后,輕輕渦旋,然后離心10秒,收集上清液到2倍體積的胎牛血
乙二醇+氯化銨誘導(dǎo)的腎結(jié)石模型2024/03/28
在適應(yīng)環(huán)境一周后,大鼠每天灌胃給藥2ml(1%乙二醇和1%氯化銨),連續(xù)4周,誘導(dǎo)結(jié)石形成。在實驗結(jié)束時,收集大鼠24小時尿液,然后犧牲大鼠,取血和腎組織。1.血清和尿液的生化分析;2.腎小球濾過率的測定;3.腎臟的組織學(xué)和免疫組化分析。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實驗室、先進(jìn)的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(
上海達(dá)為科生物科技有限公司病理平臺介紹2024/03/13
病理平臺:硬件:擁有全自動免疫組化儀、生物安全柜、熒光顯微鏡、普通光學(xué)顯微鏡、冰凍切片機(jī)、石蠟切片機(jī)等;服務(wù):主要包含樣本處理及保存、樣本包埋、切片、染色,讀片分析等;項目:免疫組織化學(xué)染色、HE染色、免疫熒光染色、特殊染色:如Masson、PAS、甲苯胺藍(lán)染色、番紅-固綠染色、油紅O染色、吉姆薩染色、尼氏染色等。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實驗室、先進(jìn)的實
上海達(dá)為科生物科技有限公司分子平臺介紹2024/03/13
分子平臺硬件:擁有全套分子生物實驗儀器,如Westernblot實驗,ABI實時定量PCR儀、臺式/柜式離心機(jī)、凝膠成像系統(tǒng)、酶標(biāo)儀、分光光度計、微生物培養(yǎng)室(包括超凈工作臺、恒溫?fù)u床)等;服務(wù):主要包含DNA/RNA/蛋白提取及測定、ELISA/生化檢測、DNA/RNA/蛋白之間互作試驗、質(zhì)粒構(gòu)建、分子克隆、基因編輯等;項目:qRT-PCR、Westernblot、ELISA、瓊脂糖電泳、基因編輯、分子克隆、質(zhì)粒構(gòu)建、DNA-蛋白互作、蛋白-蛋白互作、RNA-蛋白互作、FISH等。上海達(dá)為科生
上海達(dá)為科生物科技有限公司動物中心平臺介紹2024/03/13
動物中心硬件:擁有1600平方米的SPF級的動物實驗中心,以及200平方米的常規(guī)清潔級動物房,滿足多種動物模型的構(gòu)建,同時設(shè)有動物行為學(xué)檢測平臺:如水迷宮、曠場監(jiān)測系統(tǒng)、高十字架、平衡木等;上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實驗室、先進(jìn)的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,致力于動物
上海達(dá)為科生物科技有限公司細(xì)胞平臺介紹2024/03/13
細(xì)胞平臺硬件:擁有人、小鼠、大鼠來源的多種原代或永生化細(xì)胞株儲存的細(xì)胞庫,配備雙人操作的生物安全柜,進(jìn)口培養(yǎng)箱;服務(wù):主要包含原代細(xì)胞分離、永生化細(xì)胞株培養(yǎng)、耐藥株篩選、穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建以及細(xì)胞功能相關(guān)實驗檢測、高清顯微拍照等;項目:CCK-8、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、流式細(xì)胞術(shù)、原代細(xì)胞分離及培養(yǎng)、穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選及驗證、細(xì)胞侵襲/遷移/劃痕、平板克隆、破骨/成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化、細(xì)胞成管實驗、彗星實驗等。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研
達(dá)為科生物項目2024/02/29
達(dá)為科生物深耕生命科學(xué)領(lǐng)域十余載,積累了豐富的理論與實操經(jīng)驗,可根據(jù)不同的研究方向制定相應(yīng)的科研規(guī)劃,助力更好的科研成果產(chǎn)出。服務(wù)內(nèi)容發(fā)病機(jī)制研究:根據(jù)研究內(nèi)容,設(shè)計(優(yōu)化)方案,完成實驗服務(wù)內(nèi)容,闡述疾病的調(diào)控機(jī)制;靶向藥物設(shè)計:根據(jù)靶點信息,預(yù)測調(diào)解位點,通過虛擬篩選,體內(nèi)外實驗驗證,協(xié)助論文發(fā)表和專丨利申請;新藥研發(fā)服務(wù):將篩選的單體進(jìn)行藥效學(xué)分析,推進(jìn)成果產(chǎn)業(yè)化,完成臨床前CRO服務(wù),協(xié)助專丨利申請,協(xié)助市級或國丨家丨級發(fā)明獎等獎項申報;科室建設(shè)服務(wù):根據(jù)不同科室,從機(jī)制研究、藥物研發(fā)、
雨蛙素誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型2024/02/29
1、雨蛙素誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模原理過量給予雨蛙素,通過CCK受體,刺激胰腺腺泡細(xì)胞過度分泌,并使細(xì)胞內(nèi)的胰蛋白酶原和溶酶體水解酶分離障礙,經(jīng)組織蛋白酶B依賴性的方式激活,胰酶的活性又能夠進(jìn)一步導(dǎo)致酶原激活,引起一系列蛋白酶活性導(dǎo)致的細(xì)胞損害。胰腺組織自我消化引起的炎癥反應(yīng)募集炎癥細(xì)胞,釋放炎癥因子,進(jìn)一步引起局部甚至全身性的嚴(yán)重炎癥反應(yīng)。2、雨蛙素誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模方法在誘導(dǎo)急性胰腺炎之前,大鼠禁食18小時。對照組大鼠給予生理鹽水,模型組大鼠給予雨蛙素注射液,誘導(dǎo)劑量為(20μg/kg
CDE飲食誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型2024/02/29
1、CDE飲食誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模原理該模型致病機(jī)制可能是膽堿缺乏及乙硫氨酸干擾使細(xì)胞膜磷脂的合成障礙,使腺泡細(xì)胞外放作用受阻,出現(xiàn)溶酶體和外分泌小泡共定位,導(dǎo)致和雨蛙素類似的腺泡細(xì)胞內(nèi)消化酶激活和自我消化而發(fā)病。2、CDE飲食誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模方法小鼠標(biāo)準(zhǔn)飲食條件下適應(yīng)環(huán)境7天。然后,給模型組小鼠喂食膽堿/蛋氨酸缺乏(CDE)飲食,補(bǔ)充0.5%DL-乙硫氨酸或生理鹽水,為期3天;為了確保所有動物的暴露量相等,每24小時換新鮮的CDE飼料。對照組小鼠正常飲食,腹腔注射生理鹽水,為期3天
TNBS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型2024/02/29
1、TNBS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型造模原理TNBS它是一個小分子,本身不具有抗原性,但與宿主蛋白結(jié)合后會引起免疫反應(yīng),因此屬于半抗原。TNBS處理小鼠可建立模擬臨床克羅恩氏?。–D)的臨床前模型,其產(chǎn)生的免疫反應(yīng)是Th1介導(dǎo)的,特征在于CD4+T細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的浸潤。形成橫向進(jìn)展的炎癥,導(dǎo)致透壁結(jié)腸炎。2、TNBS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型造模方法大鼠禁食48小時,然后用戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉(40mg/kg,i.p.)。將鈍套管插入大鼠肛丨門,尖丨端向前推進(jìn)約8cm。TNBS(100
蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型2024/02/29
1、蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型造模原理蓖麻油的輕瀉作用可能引起腸道過度刺激,導(dǎo)致腸道蠕動加速,水分無法被充分吸收,從而導(dǎo)致腹瀉的發(fā)生。2、蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型造模方法(1)成年Swissalbino大鼠,重量120–150g(2)模型組大鼠口服蓖麻油1ml,然后把它們放在裝有吸附紙的籠子里,觀察4小時是否有特征性腹瀉。對照組大鼠口服0.9%生理鹽水(2ml/kg)3、蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型觀察指標(biāo)觀察并記錄小鼠體重、飲水量、攝食量、精神狀態(tài)等一般體況;依據(jù)布里斯托對糞便的分級標(biāo)準(zhǔn)觀察小鼠糞便形態(tài),分別計
小鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/02/26
1.體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠,用5%異氟醚深度麻醉小鼠,然后2.5%異氟醚維持麻醉。2.在頸部中線切開一個切口。3.分離右側(cè)的頸總動脈和迷走神經(jīng)。4.右側(cè)的頸總動脈暫時結(jié)扎。5.分離右側(cè)的頸外動脈和頸內(nèi)動脈,右側(cè)的頸內(nèi)動脈暫時結(jié)扎;右側(cè)的頸外動脈頭端結(jié)扎,近心端掛線備用。6.隨后,用無菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動脈上做一個小洞,然后插入線栓,近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動脈的線栓,以防止血從小洞中流出;松開右側(cè)頸內(nèi)動脈暫時的結(jié)扎線,輕輕送入線栓到大腦中動脈,當(dāng)感覺到阻力時
Binder C170 CO2培養(yǎng)箱細(xì)胞培養(yǎng)技巧2024/01/25
BinderC170CO2培養(yǎng)箱細(xì)胞培養(yǎng)技巧在科學(xué)研究的世界中,有許多看似微不足道的工具,卻在默默無聞中發(fā)揮著重要的作用。其中,CO2培養(yǎng)箱就是這樣一種工具。它可能不像顯微鏡、離心機(jī)那樣引人注目,但它卻是實驗室中重要的一部分,為各種生物實驗提供了穩(wěn)定的環(huán)境。BinderC170CO2培養(yǎng)箱是一種能夠控制并維持內(nèi)部二氧化碳濃度的培養(yǎng)設(shè)備。它的工作原理是通過加熱和冷卻系統(tǒng),以及精確的二氧化碳控制系統(tǒng),來模擬細(xì)胞生長的理想環(huán)境。這種環(huán)境對于許多類型的細(xì)胞來說至關(guān)重要,因為它們需要特定的溫度和二氧化碳濃
大中小型動物實驗中的動物飼養(yǎng)管理技巧2024/01/25
大中小型動物實驗中的動物飼養(yǎng)管理技巧在科學(xué)研究中,動物實驗是一種常見的方法,用于驗證假設(shè)、研究疾病機(jī)制以及評估藥物療效等。然而,動物實驗的成功與否很大程度上取決于動物的飼養(yǎng)管理技巧。本文將介紹一些在該實驗中常用的動物飼養(yǎng)管理技巧,以期提高實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。1.對于大小鼠動物實驗來說,合適的飼養(yǎng)環(huán)境是至關(guān)重要的。動物需要一個干凈、安靜、溫度適宜的環(huán)境來保持其生理和心理健康。因此,在設(shè)計實驗設(shè)施時,應(yīng)考慮到這些因素,并確保動物能夠獲得足夠的空間和舒適的生活條件。此外,定期清潔和消毒設(shè)施也是必
基于質(zhì)譜成像技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究在細(xì)胞實驗檢測中的應(yīng)用2024/01/21
近年來,隨著質(zhì)譜成像技術(shù)的不斷發(fā)展和成熟,其在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中得到了廣泛的應(yīng)用。在細(xì)胞表型實驗中,質(zhì)譜成像技術(shù)是重要的工具之一。本文將介紹基于質(zhì)譜成像技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究在細(xì)胞表型實驗中的應(yīng)用。質(zhì)譜成像技術(shù)是一種結(jié)合了質(zhì)譜分析和成像技術(shù)的新型技術(shù),它可以對樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量和定位分析。與傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)組學(xué)方法相比,質(zhì)譜成像技術(shù)具有更高的分辨率和靈敏度,可以同時檢測到數(shù)千種蛋白質(zhì),并且可以實現(xiàn)對蛋白質(zhì)的空間分布和相對豐度的精確測量。在實驗檢測中,質(zhì)譜成像技術(shù)的應(yīng)用非常廣泛。其中常見的應(yīng)用是對細(xì)胞
蛋白實驗檢測原理、方法與應(yīng)用2024/01/21
蛋白質(zhì)是生命活動的主要執(zhí)行者,對于理解生物過程和疾病機(jī)制至關(guān)重要。因此,蛋白實驗檢測在生物醫(yī)學(xué)研究中占有重要地位。下面將介紹檢測的基本原理、常用方法以及應(yīng)用領(lǐng)域。蛋白質(zhì)是由氨基酸通過肽鍵連接而成的大分子,其結(jié)構(gòu)復(fù)雜且多樣。蛋白質(zhì)的檢測主要包括定性和定量兩個方面。定性主要是確定蛋白質(zhì)的存在與否,而定量則是確定蛋白質(zhì)的數(shù)量。這需要通過對蛋白質(zhì)的物理或化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測定來實現(xiàn)。目前,常用的蛋白質(zhì)檢測方法主要有電泳、免疫印跡、質(zhì)譜分析等。電泳是一種根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和電荷進(jìn)行分離的方法,包括凝膠電泳和毛細(xì)管
類器官培養(yǎng)技術(shù)交流會2024/01/12
類器官的培養(yǎng)可以利用體細(xì)胞、成體干細(xì)胞(包括祖細(xì)胞)或多能干細(xì)胞。2009年,腸道器官模擬技術(shù)取得突破,研究人員發(fā)現(xiàn),成人腸道干細(xì)胞可以在體外增殖和自發(fā)組織化。其特征是能夠表達(dá)LGR5,這是一種編碼Wnt激動劑R-spondin受體的基因,同時需要特定的分子圍繞在旁(如Wnt、KGF和noggin)。以此為理論基礎(chǔ),研究人員開發(fā)了一種三維培養(yǎng)體系,能夠在體外重建腸道干細(xì)胞的適宜環(huán)境,并從腸道上皮細(xì)胞或單個LGR5+干細(xì)胞分化出具有自我更新能力、保持腸道腺窩絨毛狀結(jié)構(gòu)的類器官。該模型可以持續(xù)擴(kuò)增達(dá)
類器管發(fā)展史學(xué)習(xí)交流會2024/01/12
類器官(Organoids)指利用成體干細(xì)胞或多能干細(xì)胞進(jìn)行體外三維(3D)培養(yǎng)而形成的具有一定空間結(jié)構(gòu)的組織類似物。盡管類器官并不是真正意義上的人體器官,但能在結(jié)構(gòu)和功能上模擬真實器官,能夠更大程度地模擬體內(nèi)組織結(jié)構(gòu)及功能并能夠長期穩(wěn)定傳代培養(yǎng)。類器官的起源可以追溯到1907年,當(dāng)時44歲的美國貝克羅萊那大學(xué)教授威爾遜(H.V.Wilson)發(fā)現(xiàn)通過機(jī)械分離的海綿(sponge)細(xì)胞可以重新聚集并自組織成為新的具有正常功能的海綿有機(jī)體,他的研究結(jié)果于1910年發(fā)表。威爾遜的研究證明了成年的有機(jī)
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